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1、样品池

先用蒸馏水将样品池表明冲洗干净,再用洗耳球将水吹出凹槽,用滤

纸将旁边的水吸干

2、盖玻片

先用镊子,再用蒸馏水冲洗干净,然后用洗耳球将水吹到边

缘,最后用滤纸吸干

3、活酵母菌样本

先量取约20mL蒸馏水倒进烧瓶中,再从活酵母菌小瓶轻嗑10几粒

酵母菌入烧瓶中,摇匀后放入超声波器中5分钟,中间最后再摇匀

几次使酵母菌分散,便于观察

4、放入样本

将样品池放在显微镜架子上,滴入2滴活酵母菌溶液,用盖玻

片盖上

仪器操作:

1、打开显微镜,然后打开激光源,以1mA/2s的速率增加激光功率(防止脉

冲电流损坏仪器)。本实验采用的λ=780nm的近红外光,当激光器电流

升至30-40mA,激光器出光,由于出射光波长有一定范围,所以为红光。

2、激光器出光后打开CCD,CCD拍摄的是物镜上方的物体,由于没有装样

品,仅调节显微镜亮度使CCD成像清晰。然后对准载物台孔与物镜

垂直桌面。

3、滴油。由于实验中的物镜有125mm的数值孔径,为了防止这段空气产生

折射,需要在物镜上方滴半滴油,油的折射率与载玻片相同,所以不发生折

射。滴油时切忌不要让滴油嘴碰到物镜或载玻片,也不可滴多。

4、将洗好的样品放入载物台,调节载物台高度,使其刚好接触到油,这样

避免了空气间隙。

5、将配好的酵母溶液滴在样品池中,用镊子夹着盖玻片轻压在样品上,玻

片厚度为0.17mm,操作时注意不要用力。

6、将激光器电流缓慢从30mA升至70mA。

7、用CCD观察酵母细胞。微调载物台的水平位置可以实现视野的移动,方

便选择合适的酵母细胞。显微镜的上下微调,使光阱与酵母在同一水平面

上。调节光束焦面,可看到会聚光斑即为光阱所在,然后将平面上移5μ

m,此时可捕获到酵母细胞。

整理仪器:

将样品池及盖玻片从架子上取出,盖玻片可以直接扔进桶里,样品

池底面和显微镜头上面的油需要用棉签蘸取,包裹着擦镜纸轻微滚动拭去

(擦镜纸尽量节约,1/3足以,重复擦拭2-3次直至将油擦净),最后用蒸馏水将样

品池干净,倒扣放入盒中。

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