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3.为何要进行两次筛选?4.如何进行第2次筛选?培养在多孔培养板上,每孔只有一个杂交瘤细胞。专一抗体检验呈阳性。第1次筛选得到杂交瘤细胞(多种)。第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。1.本过程利用了哪些原理?免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体(1)作为诊断试剂——最广泛用途准确、高效、简易、快速(如同位素标记单克隆抗体,可诊断肿瘤、心血管畸形等疾病)(二)单克隆抗体的应用用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体技术做成的“早早孕诊断试剂盒”,灵敏度高,在妊娠第8天就可以做出诊断,比原来的诊断方法提前了10天左右,可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90%以上。(2)用于治疗疾病和运载药物主要用于治疗癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞。这样既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。“生物导弹”=抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素单克隆抗体导向,药物为弹头利用单克隆抗体的特异性两个过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法--灭活病毒一个新细胞--杂交瘤细胞一个优势--单克隆抗体特异性强、灵敏度高,并可大量制备的优势比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性;细胞全能性纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、聚乙二醇克服远源杂交不亲和,获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外,还有灭活病毒获得杂种细胞、制备单克隆抗体比较动、植物细胞杂交技术基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合,用灭活的仙台病毒处理后,不可能获得下列哪种基因型的细胞 () A.AAaaB.AaBbC.AabbD.BBbb【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是()A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点()具有原来两个或多个细胞的遗传信息B.能无限增殖C.可形成新个体D.培养过程会贴壁【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是()A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞BBA【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是()A.经过免疫的B淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的()B淋巴细胞B.T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D.杂交瘤细胞AD【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是()A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D.筛选杂交细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体B×(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠体内的细胞,从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。(2)d过程是一个_____________过程,该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。(3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成种类型的C细胞,因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养,D细胞的名称是,其特点是_________________________________________。效应B抗原细胞融合聚乙二醇灭活的病毒选择性3既能
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