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植物寄生线虫趋化行为观测技术规程
1范围
本文件规定了植物寄生线虫趋化行为测定技术中的术语和定义、泊洛沙姆（Pluronic）胶的配制、
线虫胶悬液的配制、线虫对植物根的趋化行为观测和线虫对化学物质的趋化行为观测。
本文件适用于植物寄生线虫趋化行为测定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
DB23/T2476大豆孢囊线虫病抗性室内鉴定方法
DB23/T3185设施番茄根结线虫病抗性鉴定技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
化学分配器
是指微量移液器枪头的两端各切掉1cm，将含有不同浓度化学物质的泊洛沙姆（Pluronic）胶注入
其中的装置。
4泊洛沙姆（Pluronic）胶的配制
将2瓶装有400ml的无菌水于4℃-10℃冷藏柜内预冷至少4h，将1个无菌搅拌子放入其中一个瓶
内，称取Pluronic胶粉230g加入该瓶中，再将另一瓶400ml无菌水加入该瓶中Pluronic胶粉上方，将其置
于4℃-10℃的磁力搅拌器上（100-150转/min）搅拌过夜至全部溶解呈透明液体。
5线虫胶悬液的配制
根结线虫和大豆孢囊线虫的培养及线虫的获得分别按照DB23/T3185和DB23/T2476执行。按照每
毫升胶中含有300-500条线虫，将孵化后3d以内的线虫沉淀，去上清后将线虫加入胶中，将其置于4℃-10℃
的磁力搅拌器上（150转/min）搅拌20min-30min，备用。
6线虫对植物根的趋化行为观测
6.1线虫趋化反应器设置
将直径为6cm的无菌培养皿置于冰上，吸取线虫胶悬液10ml于培养皿内。用无菌刀片切下不同
植物表面干净的根尖2cm-3cm，置于培养皿胶悬液中央，每皿内放置1个根尖，每种植物根至少重复
4皿，取出冰上所有培养皿，置于25℃恒温培养观察。
6.2线虫对植物根趋化行为观测
4h、8h、12h和24h显微镜下调查和拍照，调查距离根尖1cm内根表线虫数量，并拍照，计算
线虫的吸引率。
吸引率按式（1）计算：
=×100……（1）
式中：
P——吸引率（%）；
A——根表线虫数量；
S——胶中线虫总数量。
7线虫对化学物质的趋化行为观测
7.1线虫对无机化学物质的趋化行为观测
用无菌水将待测化学物质配制成不同浓度的溶液，用该溶液分别配制Pluronic胶，以无菌水配制的
胶为对照CK。用200ul的移液器枪头做成化学分配器，将不同浓度的Pluronic胶注入化学分配器中，
将分配器置于直径为6cm培养皿内含10ml线虫胶悬浮液中央，培养皿置于冰上操作，每处理至少4
皿，置于25℃恒温培养观察，观察装置示意图如图1所示。
2h、6h、12h、24h和48h后将培养皿倒置于显微镜下，调查化学分配器两端（半径为0.5cm的
外半圆内）线虫被吸引的数量，并计算线虫的吸引率，同时对分配器两端线虫被吸引或被趋避的现象进
行拍照。
调查被吸引
线虫的数量
化学分配器
调查被吸引
线虫的数量
图1线虫对无机化学物质的趋化行为观测装置
7.2线虫对有机化学物质的趋化行为观测
通过直径为6cm
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