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凝血酶时间（TT）测定

1.实验原理

将试剂加入抗凝血浆中，试剂中的牛凝血酶可直接作用血浆

中的纤维蛋白原生成纤维蛋白凝块，通过660nm光照射血

浆，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的

改变来测定，然后通过标准曲线求出凝血酶时间。

2.标本采集

2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。

2.23.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。

3.标本存放：全血贮存在4～10oC不超过2小时，最好1

小时内(3000r/min×15min)分离血浆，此血浆在室温22～

24oC下可存放2小时，在2～4oC可存放4小时，在-20oC

可存放2周，长时间保存需在冰冻条件下，在-70oC可存放

6个月。

冷冻血浆融化时，应将盛血浆的容器置37oC水浴中，并轻

轻摇动，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解冻后立即测

试。冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果不准确。

4.标本运输：低温条件下运输。

5.标本拒收的标准：抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,

脂血标本不能作测定。

6.实验材料：

6.1每个试剂均购自德国DadeBehringMarburg公司。

1）TT测定试剂盒（代号P/N:9758515）

冻干牛凝血酶（含缓冲液和稳定剂）4瓶

浓缩稀释液（含CaCl2500mmol/L、缓冲液、防腐剂）1瓶

注意：稀释液中含有叠氮钠，在金属铅制品中可形成爆炸性

叠氮化物，应适当处理。

2）定标血浆CalibrationPlasma（代号P/N:）

3）正常质控血浆Normalcontrolplasma（代号P/N:

6.2试剂准备

浓缩稀释液：用蒸馏水1：5（1+4）稀释浓缩的稀释液。

冻干牛凝血酶：根据样品来源和分析需要来制备。

稀释好的稀释液/1瓶凝血酶浓度

筛选实验5.0ml3.0uNIH/ml

8.0ml1.9uNIH/ml

肝素治疗2.0ml7.5uNIH/ml

盖上盖子，轻摇至完全溶解，置15～25oC30分钟，用前摇

匀，勿用力振摇。

6.3试剂保存

未开封的试剂可保存在2～8oC至试剂盒上标明的有效期。

稀释好的稀释液在15～25oC可保存1个月；牛凝血酶溶解

后，于原瓶中2～8oC，15天内有效

建议试剂不使用时，最好将其倒回原瓶中，保存于2～8oC。

7.仪器设备：

7.1仪器名称：syxmexCA7000全自动血凝仪

7.2仪器厂家：日本希森美康公司

7.3仪器型号：CA7000

7.4仪器技术参数：

7.4.1试剂位：18个，具冷藏功能。

7.4.2样本位：40个，可通过换盘连续添加。

7.5仪器校准程序：

7.5.1校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，

仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。

7.5.2校准操作：设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程

师执行)。

8.操作步骤：

8.1开机：CA7000的开关在仪器的右侧。开机后仪器自检，

当屏幕上边显示Ready时可进行试检

8.2洗针：在主屏幕上选RinseProbe键，然后按Execute进

行洗针

8.3检查消耗品：

1.准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯

是否够量，不足时，需及时添加。

2.准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把每一项的试剂准

备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的量和有效期。

如还不熟悉试剂位置时，可在主屏幕上选Reagent