《广西《牛传染性鼻气管炎病毒的检测巢式聚合酶链反应》编写说明》.pdf

一、项目目的意义（项目背景）、项目来源、工作概况

1、项目背景

广西养牛业发展十分迅速，拥有占全国第5位的牛存栏量，但在

牛传染性鼻气管炎（Infectiousbovinerhinotracheitisvirus，

IBRV）的防治方面十分薄弱。IBRV主要引起牛高热、鼻炎、呼吸困

难和母畜流产等疾病，自2008年以来，广西多个牛场相继反复暴发

此病，无法根除，给广西给养牛业带来极大的危害。

目前国内外均没有关于IBRV巢式PCR诊断技术规范。巢式PCR

是一种新型的核酸检测技术，其灵敏度又比普通PCR高100-10000倍，

且操作简便，特异性强、成本低，已被广泛应用于动物疫病的诊断中。

广西兽医研究所多年来研究牛传染性鼻气管炎病毒，并建立了巢

式PCR检测方法，其特异性强、敏感性高。既可以对分离培养物的

IBRVDNA进行检测,也可以对直接从临床样品中取样抽提的IBRV

DNA进行检测，而且整个操作过程不超过8小时。为了使这一先进的

病原检测技术能更好地为生产服务，特制定本技术操作标准。内容涵

盖应用巢式PCR检测IBRV的材料准备、操作方法及结果判定，建立

牛IBRV的快速、特异、灵敏的检测技术地方标准，为牛IBRV的综合

防控体系提供诊断技术支撑，这对搞好我区牛IBRV的综合防控体系

建设具有重要现实意义。

2.项目来源

根据《广西壮族自治区市场监督管理局关于下达2018年第二批

广西地方标准制定项目计划的通知》（桂市监函〔2018〕253号）精

1

神，由广西兽医研究所承担《牛传染性鼻气管炎病毒的检测巢式聚

合酶链反应法》广西地方标准于2018年12月获得立项（编号

2018-0271），本标准由广西畜牧业标准化技术委员会提出，广西兽医

研究所负责起草。

3.工作概况

本标准起草团队长期从事牛传染性鼻气管炎病毒相关技术的研

究，先后建立了多种IBRV的诊断技术，发表论文5篇，其中SCI论

文2篇，并将这些技术在临床诊断上进行应用。上述技术支持确保能

完成本标准起草制定任务。

2018年初本标准起草团队起草制订牛传染性鼻气管炎病毒广西

地方标准项目建议书，开展标准的申报。早在2017年1月-2018年

1月成立标准起草工作小组，收集资料，调查研究，编写制订标准。

标准起草小组赴南宁、柳州、来宾、北海、钦州、桂林等广西养

牛业发展较快的地区及相关牛场企业进行考察，调研和检疫，了解广

西IBRV流行毒株的发病症状，序列特点，传播途径等流行病学调查。

并查阅相关文献资料，以及聚合酶链式反应法的技术要领，结合我区

疫情及流行毒株特点，分析IBRV保守序列gB基因，设计引物，通过

实验室研究试验及临床验证后，编写制定IBRV巢式PCR检测标准操

作规程征求意见稿。

本标准起草人员：范晴、张民秀、王盛、庞耀珊、刘加波。

二、标准编制原则

1.政策性原则

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本标准编写过程遵循国家相关法律、法规和国家标准。

2.先进性原则

以国内外相关文献资料为参考，力求反映该领域必威体育精装版的科技成

果。以国内同类标准制订编写方法为基础，对本标准进行规范、充实

和创新，使之具有先进性。

3.经济性原则

本项目为自筹经费项目，因此在本标准编制过程，从获取信息、

起草、实验室及临床验证到形成征求意见稿的逐一环节，在确保质量

的前提下均力行节约，利用有限的经费圆满完成各阶段编写工作。

4.适用性原则

本标准集国内外IBRV的PCR检测技术的成功经验，并经实验室

与临床应用验证，且完全按照国家标准的要求编写，内容全面，形式

规范，可操作和实用性强。

5.协调统一性原则

本标准参照国内相关标准的编写形式和表达方法，力求与国内相

关标准的协调统一。本标准通过持续查新，确保内容不与已有的国家

标准、行业标准和地方标准重复或相矛盾。

6.规范化原则

本标准是严格按照GB/T1.1—2009的要求来编写的。

三、标准主要主要技术内容及依据

本标准的主要依据是参考有关文献资料，结合我区区情，通过实

验室研究试验及临床验证后，并参考其他资料经室内、室间验证提出。