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一、有益菌:乳酸杆菌,双歧杆菌,柔嫩梭菌,丁酸梭菌,芽孢杆
菌(枯草、地衣)。5种
有害菌:大肠杆菌,沙门氏菌,产气荚膜梭菌,空肠弯曲杆菌。
4种
二、厌氧菌:乳酸杆菌,双歧杆菌,产气荚膜梭菌,丁酸梭菌,柔嫩
梭菌。5种
需氧菌:芽孢杆菌。1种
兼性厌氧菌:大肠杆菌,沙门氏菌。2种
注:空肠弯曲杆菌:微需氧菌,在含2.5~5%氧和10%CO2的环
境中生长最好。最适温度为37~42℃。在正常大气或无氧环境中均
不能生长。
肠道正常菌群中95%以上为专性厌氧菌,兼性厌氧菌和需氧菌在正
常菌群中所占比例较少。
三、一般检测菌株包括厌氧菌中的双歧杆菌、拟杆菌、优杆菌、消化
性球菌、乳杆菌及梭菌。
需氧菌中的肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌,及酵母菌等。
四、无氧环境的简易操作:
1、方法来自文献《健康羊驼粪球中主要正常菌群的分离与初步鉴
定》
采用干燥器培养,1m3空间用焦性没食子酸10g、10%氢氧化钠溶
液l00mL,按比例取10%的氢氧化钠液置于干燥器皿底部,然后放置
2到3个略高于液面的青霉素小瓶,再按比例称取焦性没食子酸用纸
包好,放在圆柱上。继而放上隔板,将接种完毕的培养基放于隔板上,
同时放美蓝指示剂一管。盖上缸盖并用石蜡封闭。再轻轻摇动干燥器,
使焦性没食子酸掉人氢氧化钠液中,反应后,干燥器内无氧,美蓝指
示剂由蓝变白。置于温箱37℃培养24一48h观察结果。
2、方法来自文献《健康猪肠道菌群的分离培养与耐药性分析》
后者先拧紧瓶盖,放入密封性较好的玻璃罐(用凡士林封口),通过蜡
烛燃烧法制作简易厌氧装置。
五、CO培养箱不可代替无氧培养箱
2
厌氧箱一般是组合气体90%氮气+5%氢气+5%二氧化碳,厌氧箱里
面培养的微生物都是厌氧微生物;而二氧化碳培养箱里面是5%二氧
化碳+95%空气,里面是有一部分氧气的。一般的研究认为严格厌氧
菌的培养环境中O2的浓度必须小于1000ppm(千分之一),更严格
的环境是小于300ppm(万分之三),本实验室CO2培养箱CO2浓度
范围为280-2000ppm,所以CO2培养箱是不能用来培养严格厌氧菌。
(1ppm即百万分之一)。
目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有:厌氧箱培养技
术;厌氧罐培养技术;厌氧袋培养技术;
1.一般性的细菌培养标本若需延迟送检时,应置于4度冰箱保存,且
不能超过24小时。
2.临床标本最佳运送时间取决于标本的量,少量液体(小于1ml)
或组织(小于1cm3)应在15~30分钟内送到实验室,较多量的标本
置于运送培养基中可放12~24小时,厌氧培养标本原则上是床边接
种,如延迟送检,需保存在厌氧运送培养基中,室温保存,不得超过
24小时。低温对一些厌氧菌有害。
1.采样和运输:同时间、同地点、同位置分别取两管平行粪样,可适量
多取,一管做需氧菌分离和提纯,另一管做厌氧菌的分离和提纯;需
氧菌按原方案用冰块运输,厌氧菌放置于厌氧生物袋常温运输(一般
认为,低温对某些厌氧菌有害,并且氧的溶解度较高)。
2.保存:标本送至实验室后,应尽快处理,最迟不超过24h。需氧菌放
置于4℃冰箱保存,厌氧菌放置于常温保存。
3.分离、纯化:需氧菌按原计划进行。厌氧菌培养基中添加万分之五的
半胱氨酸或硫化钠做还原剂,消除培养皿内部氧气。
1.一般性的细菌培养标本若需延迟送检时,应置于4度冰箱保存,且
不能超过24小时。
2.临床标本最佳运送时间取决于标本的量,少量液体(小于1ml)
或组织(小于1cm3)应在15~30分钟内送到实验室,较多量的标本
置于运送培养基中可放12~24小时,厌氧培养标本原则上是床边接
种,如延迟送检,需保存在厌氧运送培养基中,室温保存,不得超过
24小时。低温对一些厌氧菌有害。
研培
究养微生
位样
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