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亲和偶联-组氨酸标签(His-tag)
亲和层析法(IMAC)是目前最广泛使用的纯化技术,该技术是基于蛋白表面残基(组氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等)与过渡金属阳离子的相互作用而形成螯合,该过渡金属/蛋白络合物再与螯功能基团链接到琼脂糖微球上,通常通过降低pH值或添加咪唑的方式来洗脱目标蛋白。
低耐压
ABT提供两种螯合微球,使用标准交联微球的两种配基:亚氨基二乙酸(IDA)和次氮基三乙酸(NTA)。
IDA交联琼脂糖凝胶是由亚氨基二乙酸基团通过间隔臂连接稳定的醚键组成,IDA是一种三齿螯合剂,与交联的琼脂糖微球共价偶联。该凝胶载有二价金属(Ni2+,Cu2+,Zn2+或Co2+),使得该凝胶(即使可用状态)成为快速纯化带有组氨酸标签的目标蛋白的理想材料。
与其他螯合凝胶相比,如NTA琼脂糖,IDA具有三个与金属离子相互作用的位点,而非四个位点的NTA。IDA凝胶通常更易再生,从而可用较低浓度的咪唑更好地洗脱结合的融合蛋白。
该产品范围涵盖四种不同类型的金属离子和两种不同密度的基团。
-镍螯合物可识别两个暴露的目标残基(通常是组氨酸)以实现有效的蛋白质结合,推荐用于大多数带组氨酸标签的蛋白质纯化。
-锌螯合物似乎可以识别相邻位置的两个暴露的目标残基,建议用于难以分离的蛋白质。
-钴螯合物可识别两个暴露的目标邻位残基,这种填料提供了非常好的选择性。
-铜螯合物可识别单个暴露的目标残留物,这种填料推荐用于难分离的蛋白质。
凝胶的选择取决于每一次纯化的目的或优先级(结合载量/特异性)和纯化蛋白的类型(纯化的难易程度)。
NTA交联琼脂糖凝胶由用次氮三乙酸(NTA)衍生并负载二价镍离子的琼脂糖组成,NTA是一种四配位基的螯合剂,占据镍离子配位点中的六个结合位点的四个。其他两个配位点通常被可与重组蛋白的组氨酸残基相互作用的水分子占据,这种结合最大限度地减少了纯化过程中的金属脱落。
高耐压
镍和钴是IMAC纯化中最常用的金属离子,镍/钴RapidRun?微球整合了金属离子结合的优势和RapidRun?凝胶的高流速。这些产品非常适合大规模的组氨酸标签(His-Tag)蛋白纯化。
NickelAgaroseExtrachel?是一种预装了与配体紧密结合的镍离子凝胶,在20mMEDTA中孵育后,镍仍然与螯合配体结合。
低耐压:螯合琼脂糖微球和预装柱
大包装填料
ABT提供利用IMAC技术的组氨酸标签(his-tag)蛋白纯化填料
-不同的活化程度以优化结合载量和纯化特异性的关系
-填料螯合有镍、铜、锌或钴离子,也有无金属离子的
-可用于批量或纯化柱纯化
预装柱
ABT提供即时可用的重力柱,预装了利用IMAC技术的组氨酸标签(his-tag)蛋白纯化填料快速而简便的纯化
-快速而简便的纯化
-用于重力层析
-无需纯化系统
-提供镍和钴两种金属离子选择
-提供1ml和5ml两种规格
低耐压:镍NTA琼脂糖微球和预装柱
大包装填料
镍NTA琼脂糖填料是由次氮基三乙酸(NTA)衍生,并负载二价镍离子的交联琼脂糖组成。这是还原条件下最常用的IMAC填料,因为螯合物上有四个金属结合位点,可实现高蛋白质结合和最小化金属离子脱落。
-一步纯化
-高载量
-原生或变形条件下的纯化
-最小化金属离子脱离
预装柱
5ml的镍NTA琼脂糖预装柱是预装好了的即时可用的产品,可以用于MPLC、FPLC和?KTA?相关的设备上。
ABT提供1支和5支包装的5ml镍NTA琼脂糖预装柱。
高耐压:ChelatingRapidRun?琼脂糖微球
大包装填料
镍、钴和无金属离子的RapidRun?琼脂糖微球是专为对带有组氨酸标签的蛋白(His-tag)进行大规模下游纯化而设计的,并且比其他市面产品的流速高70%。
-极易放大且经久耐用
-极高的物理和化学稳定性
-在最小时间里达到优异的分辨率
预装柱
5ml的镍亲和预装柱用于纯化组氨酸标签(his-tag)蛋白。
-无需优化或改变操作流程
-优异的适应性:预装柱可用于MPLC、FPLC和?KTA?设备
-与市售产品相比,可一步获取高纯度产物
高耐压:NickelRapidRun?
大包装填料
该填料由带有次氮基三乙酸(NTA)配基的高度交联凝胶制成,该填料可以在含有还原剂的情况下依然具有良好的性能,专为大规模下游纯化组氨酸标签(his-tag)蛋白而设计。
高耐压:NickelAgaroseExtrachel?
大包装填料
NickelAgaroseExtrachel?
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