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1、中国几大药源是什么？三大药源：化学药、中药、生物药:生化药物、

微生物药物、生物制品

2、生物药物、生物制药定义

生物药物：泛指包括生物制品在内的生物体的初级和次极代谢产物或生

物体的某一组成部分，甚至整个生物体用作诊断和治疗疾病的医药品。

生物技术制药：采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产

医药品。

3、生物药物分类：（1）重组DNA药物：应用重组DNA技术（包括基因

工程技术和蛋白质工程技术）制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂。

（2）基因药物：以遗传物质DNA、RNA为物质基础制造的药物基因

治疗、基因疫苗、反义药物、核酶等（3）天然生物药物（4）合成或半

合成生物药物

4、几类抗生素的主要特性及生产菌种,了解提取工艺。

5、基因工程制药的主要程序？获得目的基因-组建重组质粒-构建基因

工程菌-培养工程菌-产物分离纯化-除菌过滤-半成品检定-成品检定-

包装

6、常用基因工程制药载体类型和特点？类型:克隆载体、转录载体、表

达载体

7、质粒不稳定的类型或表现形式?原因⑴含质粒菌产生不含质粒子代

菌的频率；质粒丢失率与宿主菌、质粒特性和培养条件有关。⑵两种

菌比生长速率差异的大小。分类：（1）分裂不稳定：指工程菌分裂时

出现一定比例不含质粒子代菌的现象（常见）。（2）结构不稳定：指外

源基因从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。

8、质粒稳定性的分析方法：样品-不含抗性标记抗生素、平板培养基--

条件10-12h和100个菌落--含抗性标记抗生素、平板培养基--条件

10-12h--统计生长菌落数。重复三次,计算比值(稳定性stability)

9、为了提高质粒稳定性，工程菌培养采用什么方法?选择合适的宿主

菌、选择合适的载体拷贝数、选择压力只能消除分裂不稳定性。、两

阶段培养法菌体生长--诱导表达、调控环境参数-温度、pH、培养

基组分和溶解氧浓度、固定化

10、基因表达的宿主细胞分类？1、原核细胞：大肠杆菌、、枯草芽孢杆

菌、链霉菌2、真核细胞：酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞

11、克隆真核基因的常用方法？逆转录法和化学合成法。一、逆转录法：

逆转录法就是先分离纯化目的基因的mRNA，再反转录成cDNA，然后进

行cDNA的克隆表达。⒈mRNA的纯化⒉cDNA第一链的合成⒊cDNA第

二链的合成⒋cDNA的克隆⒌将重组体导入宿主细胞：⒍cDNA文库的

鉴定：抗性基因失活法、噬菌斑颜色改变法⒎目的cDNA克隆的分离和

鉴定：核酸探针杂交法、免疫反应鉴定法。二、化学合成法：较小的

蛋白质或多肽的编码基因可以用化学合成法合成。必须知道目的基因的

核苷酸顺序或目的蛋白质的氨基酸顺序。再按相应的密码子推导出DNA

的核甘酸序列。用化学法合成目的基因DNA不同部位的两条链的寡核苷

酸短片段，再退火成为两端形成粘性末端的DNA双链片段，然后将这些

双链片段按正确的次序进行退火使连接成较长的DNA片段，再用连接酶

连接成完整的基因。

12、对基因工程菌发酵影响较大的几个因素？1、培养基的影响2、接种

量的影响3、温度的影响：如重组人生长激素：30℃培养，产物可溶37℃

培养，形成包涵体。4、溶解氧的影响5、诱导时机的影响6、pH的影响

13、基因工程药物、肽图分析1、基因工程药物：A、胰岛素B、干扰

素C、人白细胞介素-22、肽图分析：是用酶法或化学法降解目的蛋白

质，对生成的肽段进行分离分析，它是检测蛋白质一级结构最有效的方

法，该技术灵敏高效是对基因工程药物的分子结构和遗传稳定性进行评

价和验证的首先方法。常用HPLC和毛细管电泳

14、单克隆抗体、多克隆抗体、抗体、免疫佐剂、双功能抗体

单克隆抗体定义：由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原分子某

一特定抗原决定簇的特异性抗体。

多克隆抗体定义：指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原

决定簇的多种抗体混合物。

抗体：机体受抗原刺激后产生的，并且能与该抗原发生特异性结合的免

疫球蛋白。

免疫佐剂：由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生

免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强

抗原的抗原性物质