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医院感染环境监测微生物标本采集教材

医院感染监测与管理，指在医院环境中控制感染的管理措施，包括合理设置医院感染监测点，

确定监测指标，以及控制监测指标的实现。一般指将监测指标分解为控制目标和措施的量化。控

制目标是对医院感染进行有效控制。控制目标包括医院感染控制指标的实现及控制目标的实现。

实现需要控制的目标是实施目标，实现控制目标的主要手段是控制监测指标。监测指标中的监测

指标是指为实现对监测指标的监测、评价和控制而设定的各种方法。包括控制指标监测和控制监

测，控制指标包括在监测指标中包含的各项要求。通常有五大类：目的控制目标；病原控制目标；

技术指标。控制计划是指采取和实施控制措施的总体规划；管理与控制计划。控制目标是指控制

措施的数量、指标和时间要求，如环境空气中细菌数量(10mL/h)、病原菌数（包括耐多药菌种）

等；目标是指控制这些感染发生、发展和控制过程；目标及指标完成后采取的措施；质量管理和

评价方法。控制措施包括技术计划和管理措施等。技术措施主要包括：对人员实施良好操作规程

和执行效果进行评价；制定监测指标时注意与其所需指标的衔接协调；对结果的处理与记录；分

析结果统计分析，预测等。具体可归纳为七大类；检测指标体系包括：病毒、细菌、真菌、分枝

杆菌、原虫等各类病原体。其中微生物监测包括医院感染控制工作需要的重要参数设置和监测，

细菌数测量和计数，病原微生物鉴定标本采集和保存计划等内容。其基本方法有微生物定植菌检

测法（或称PIC法),又称为定性定量分析法或定量标准方法的一种。是指通过实验测试控制的

过程。以生物标本信息（如：基因图谱）为基础形成检测样品报告。主要依据《医院感染监测规

范》范》中规定的中规定的相关内容相关内容；；临床临床中常中常用用微生物微生物检检测指标和项目监测测指标和项目监测报告编写报告编写要求。要求。在医院感染流

行监测任务的基础上不断创新”；其他方法：如血清学

1.PIC法

包括微生物定植菌的鉴定、培养和定量方法。目前广泛应用的是BR法。其基本原理是利用

酶分子的热稳定性以测定样品中微生物是否处于定植状态而进行诊断。在采集标本时，将样本置

于载玻片上，待检测样品干透后贴在显微镜下观察标本中是否有活的微生物生长。操作简便，无

不良反应、快速准确，可以作为微生物鉴定诊断的一种方法。微生物定植菌检测方法基本流程：

采集标本培养——质谱法测定——荧光定量测定（荧光定量印迹法）或酶定量测定（酶联免疫吸

附法）测定。操作方法：使用BR培养基中加入无菌生理盐水溶液稀释10倍进行培养，经20min

培养至20-30分钟后取出并接种于载玻片上即得到结果。此结果可直接测定。如果所测得结果大

于5000U/ml则为合格检验报告法的有效结果。PIC法在临床中应用广泛。一般用来判断细菌感

染严重程度和细菌密度等。具有检测灵敏度高、特异度高等特点。但该法操作过程繁琐，并且容

易造成假阳性。另外还有其他一些影响结果真实性的方法，如荧光定量酶标法和免疫吸附法检测

等。一般检测条件：标本须经灭菌后方可进行检验。目前主要用于真菌和细菌的定性或定量鉴定

中。由于操作简便且成本低廉而应用十分广泛。主要用于检测分离的菌种及其生长条件等。

2.SMILE法

又称为定量定量分析法，是由微生物定植菌的鉴定与检测技术发展而来的。其工作原理是：

用琼脂作底物，在平板上均匀地涂上一层薄薄的液体，随后进行操作。在加点前，应先加少量稀

释液(0.1%稀释液),然后加少量水，直至滴满，加完，静置片刻，取1~2滴无菌胶体金或无菌的

溶液(0.1%和0.5%等）加于稀释液中观察数分钟，在此温度下测定其变化数，直到其变化小于0.5%

为无菌。用培养皿放入液面滴加培养基(10~20ml)于培养皿中，盖好培养基盖，以20~30分钟。

一般情况下，此时间应不超过20min。当试管出现微细颗粒状时即可作为定植菌的鉴定依据。

如在一次稀释溶液中加入1%稀释液10ml。在培养液中加入1000~2000U试管静置一分钟后再加

入50ml稀释液中。重复3次5分钟或1分钟后取下试管盖以保持其表面干燥。即表明该培养基

为有效培养物。这种方法的优点是：操作简单；所需时间短；结果可靠；敏感性高(99.5%);检测

时间短，一般15min;对某些菌（如大肠埃希菌）还可快速测定。但因其采用固体试纸代替培养

基可使所需培养时间缩短至10~20min及20~30min;所需检测时间