质谱的临床应用【21页】.pptx

质谱的临床应用

报告大纲前言质谱技术在小分子检测中的应用质谱技术在蛋白质多肽组学研究中的应用质谱技术在基因检测中的应用质谱技术在临床应用中的优势及不足

实验室常见质谱种类LC-MS/MS液相色谱-串联质谱小分子定量分析质谱临床应用的主要用途GC-MS气相色谱-串联质谱挥发性化合物检测尿液有机酸分析QTOFMS／Orbit飞行时间／轨道离子阱分析器多肽、蛋白、未知物鉴定MALDI-TOFMS基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱多肽、蛋白、寡核苷酸、微生物、SNP基因检测ICP-MS电感耦合等离子体质谱微量元素分析3定量分析

小分子检测-药物检测LC-MS/MS为药物筛查和确认的金标准，可同时检测数十种药物YuanC,etal.ClinicalChemistryandLaboratoryMedicine.50(1):95-103,2012.

小分子检测-类固醇类激素检测

小分子检测-维生素检测

小分子检测-微量元素/重金属检测

新生儿遗传代谢病检测

新生儿遗传代谢病检测

蛋白质多肽检测-微生物鉴定生化鉴定方法质谱鉴定方法（MALDI-TOF）优点经典：通过生化反应，对于利用和杀死微生物有利快速：两分钟完成鉴定成本低：几块钱既得结果需菌少：一个菌落即可缺点时间长：＞3h以上成本高：＞50元/株试剂多：不同类别的菌需要不同的试剂卡完全依靠数据库，数据库中没有的菌，对后续工作没有任何意义

微生物鉴定实验流程分离平板涂抹靶板质谱检测图谱分析数据库比对鉴定

质谱微生物检测发展方向-药敏鉴定

病原微生物感染标志物研究局部炎症鉴别诊断研究正常对照组血清多肽质谱图Ａ菌血清多肽质谱图

粘多糖病的诊断与鉴别诊断研究正常人晨尿的多肽谱图MPSII患者晨尿的多肽谱图

验证与转化

基因检测-MALDI-TOF质谱核酸与蛋白的特性不同，易吸附阳离子，电离过程中更易碎片化;基于MALDI-TOF原理，从基质，靶板，仪器参数设置、原始数据处理及结果呈现方式等多方面进行专门优化可用于SNP、突变及DNA甲基化检测

质谱法基因检测应用-DNA甲基化检测产前孕妇外周血游离DNARh血型筛查

荧光定量PCR一代测序高通量测序数字PCRMALDI-TOF质谱灵敏度中低高高高准确性中高高高高数据分析中易难中易仪器操作易中难中中样本成本低中高中高低检测通量低中高低中常用基因检测平台特点比较

质谱在临床应用上的优点临床应用范围广：药物、蛋白质多肽、代谢产物、核酸、离子特异性高vs免疫分析：干扰物，缺乏特异性:一些药物，类固醇，甲状腺激素,蛋白质高通量:同种方法同时检测多种分析物。更适用于正常—疾病之间、疾病发展过程中不同阶段差异万分的筛选。

质谱在临床应用上的不足设备成本高(百万级)方法开发：没有可用的通用方法，绝大多数质谱方法是实验室自主开发的（Laboratorydevelopedtests,LDTs）高复杂性：专业技术（样品制备+操作）；标准化困难；封闭式平台，不同厂家数据分析软件无法通用；自动化程度有待提高；应用临床检测的灵活性不高。