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《食品安全国家标准食品中阿力甜的测定》编制说明
一、标准起草的基本情况
1、任务来源:中华人民共和国卫生部
2、标准主要起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
3、主要起草人:
研制人员
姓名
性别
年龄
职称
职务
专业
单位
项目负责人
杨大进
男
44
研究员
副主任
食品化学
中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
主要参加人员
蒋定国
男
36
副研究员
/
分析化学
中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
鲁杰
女
35
副研究员
/
营养与食品卫生学
中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
二、标准的重要内容及主要修改情况
1、方法前处理条件的选择
根据阿力甜的易溶于水特性可选择水作为提取溶剂,可使操作更简单、提取效果更好、更安全、更经济,提取时根据阿力甜在试样中的含量来确定水的体积。由于化学性质较为稳定,提取时不用考虑提取液的酸碱性影响。采用超声波振荡提取,提取溶液离心取上清液或者过滤膜即可供液相色谱分析。
对于乳饮料,由于这类试样都是乳白色稳定胶体,为了得到透明的提取液,必须去除其中的蛋白质等成分,本方法采用了乙醇沉淀方法,操作简单快捷,沉淀效果较好。
2、方法色谱条件的选择
2.2.1流动相
为了检测的方便以及考虑盐对色谱系统的影响和较长时间的平衡,本方法的流动相中不使用离子对,同时研究发现流动相只需要甲醇和水,调节好二者的体积比即可很好将阿力甜和杂质分开。
通过反复试验排除了各种常用食品添加剂的影响,最后确定为:对于乳饮料类试样,选择流动相为甲醇:水=45:55,流速为0.8mL/min;对于其它试样:选择流动相为甲醇:水=53:47,流速为0.8mL/min。
在流速为0.8mL/min,流动相比例变化对阿力甜保留时间的影响,见图1-6:
AU
AU
-0.01
0.00
0.01
0.02
0.03
Minutes
2.00
4.00
6.00
8.00
10.00
12.00
14.00
8.250
12.214
图1阿力甜的标准图(流动相为甲醇:水=65:35)
图2阿力甜的标准图(流动相为甲醇:水=60:40)
图3阿力甜的标准图(流动相为甲醇:水=53:47)
图4阿力甜的标准图(流动相为甲醇:水=50:50)
图5图6
图5乳饮料的空白色谱图图6标准色谱图(流动相为甲醇/水=45/55)
(流动相为甲醇/水=45/55)
2.2.2波长的选择
通过二极管阵列检测器获得的光谱图可知,在上述流动相中阿力甜在200.7nm处有最大吸收,故选择200nm为检测波长。
图7在流动相中阿力甜的紫外扫描光谱图
3、方法的精密度和准确度
3.1固体试样
称取12份0.25g空白试样,前6份添加5mL530μg/mL阿力甜标准溶液,后6份添加1mL530μg/mL阿力甜标准溶液,每份用重蒸水提取、定容到25mL,分别进行测定,求得方法的加标回收率及精密度,结果见下表。
表1试样的加标回收率及精密度
类别
添加水平(g/mL)
1
2
3
4
5
6
平均
RSD(%)
峰面积
106
2600430
2604979
2415762
2428951
2421524
2411987
2480606
3.8
回收率(%)
104.5
104.7
97.12
97.66
97.36
96.97
99.72
3.8
峰面积
21.2
551321
533557
525017
545923
551598
572941
546726
3.0
回收率(%)
96.09
93.00
92.50
95.15
96.14
99.86
95.46
3.0
注:回收率是按外标单点法计算。
从上表可知,对于固体试样,本方法的回收率和精密度较好,完全满足食品添加剂常规理化检验要求。
3.2乳试样
对5种乳饮料进行5次低浓度回收试验和5次高浓度回收试验。其结果见表2。
表2中10次回收试验结果,回收率范围95.3%~100.6%,平均回收率97.8%,R.S.D为4.09%。
表2乳饮料试样加标实验结果
乳饮料名称
试样本底值(g/kg)
称取试样量(g)
加入标准量(mg)
定容体积
(mL)
计算值(mg)
回收率(%)
强人AD钙奶
0
5.154
0.4
25.0
0.386
96.5
0
5.105
0.16
25.0
0.149
93.1
强人铁锌钙奶
0
5.224
0.4
25.0
0.391
97.8
0
5.263
0.16
25.0
0.159
99.4
小洋人新一代
0
5.154
0
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