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沉香化滞丸微生物限度方法学验证及报告

1、供试品

检品名称：沉香化滞丸

规格：6g/袋×10袋/盒

产品批号：130423013042401304210

生产单位：河南爱民药业集团股份有限公司

检验依据：《中国药典》2010年版一部

2、微生物限度验证所用菌种

大肠埃希菌〔CMCC(B)44102〕

枯草芽孢杆菌〔CMCC(B)63501〕

白色念球菌〔CMCC(F)98001〕

金黄色葡萄球菌〔CMCC(B)26003〕

3、方法：

《中国药典》2010年版一部微生物限度检查中薄膜过滤法验证（附

录XⅢC）

3.1菌液制备

(1)取经37℃培养18~24h，金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯

-5-7

草杆菌的营养肉汤培养物1ml+9ml0.9%盐水，10倍稀释至10~10，

细菌数约为50~100cfu/ml，做活菌计数备用。

(2)经25℃培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml

-5-7

+9ml0.9%盐水10倍稀释至10~10，菌数约为50~100cfu/ml，做

活菌计数备用。

3.2结果见表1、表2

表1细菌计数结果

大肠埃希菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌

菌种

（10）（10）（10）

-7-6-5

计数

727685917678

（CFU）

均值

748877

（CFU）

表2霉菌计数结果

菌种白色念球菌（10）

-5

计数（CFU）6971

均值（CFU）70

4、供试液的制备

4.1取供试品10g，置研钵中研细，慢慢加入45℃PH7.0无菌氯化钠-

蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，作为1：10的供试液，分别人

工污染上述四种代表试验菌株。

5、回收率测定：

5.1试验组

取1ml1：10供试液，分别加入含菌数为50～100cfu的试验菌

1ml，分别注入平皿中，立即倾入营养琼脂培养基（细菌）与玫瑰红

钠培养基（霉菌），细菌：33℃培养72小时，霉菌、酵母菌：26℃培

养120小时。

5.2菌液组

取含菌数为50～100cfu的试验菌各1ml，分别注入平皿中，立

即倾入营养琼脂培养基（细菌）与玫瑰红钠培养基（霉菌），细菌：

33℃培养72小时，霉菌、酵母菌：26℃培养120小时。

5.3供试品对照组：

取1ml1：10供试液，分别注入平皿中，立即倾入营养琼脂培

养基（细菌）与玫瑰红钠培养基（霉菌），细菌：33℃培养72小时，

霉菌、酵母菌：25℃培养120小时。

5.4稀释剂对照组：