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药物代谢动力学实验考查知识点整理

第一部分：HPLC使用注意事项

组成：泵、进样器、色谱柱、检测器、数据系统/积分仪

1、HPLC

2、反相色谱：

分离机理：“反相色谱”固定相极性小于流动相极性

常用流动相：乙腈、甲醇，水

3、色谱柱的分类：

按填料：球形、无定形

按含碳量：C18、C8

按应用：分析柱、制备柱、预处理柱

按粒径：150mm*4.6mm,5μm等

按填料类型：正相柱、反相柱、手性柱

4、键合相色谱柱的优缺点：

优点：稳定不易流失；

应用广泛，可使用多种溶剂；

消除硅羟基的不良影响；

缺点：pH得在3~8范围内

5、C18柱的活化：90%10%90%的甲醇溶液1ml/min依次冲洗30min

6、流动相：

使用之前需超声脱气（PPT18）

目的：色谱泵输液准确

提高检测性能

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保护色谱柱

流动相脱气的方法：加热，抽真空，超声，通惰性气体

流动相组成：

流动相配置：

缓冲溶液现用现配，不要储存时间过长，避免pH值发生变

化和成分分解，影响色谱分离的效果；

有机溶液和缓冲液使用前均需经0.45μm微孔滤膜过滤；

流动相使用前脱气。

7、常用定量方法：

外标法

内标法（准确麻烦）

内标物的要求：

化学结构与待测品相似；

样品中不存在；

不与样品组分发生化学反应；

保留值与待测值接近；

浓度相当；

与其他色谱峰分离好

8、样品的预处理：

目的：除杂质；浓缩微量成分；改善分离；保护色谱柱；提

高检测灵敏度

方法：高速离心，过滤，选择性沉淀，衍生反应；液固萃取、

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液液萃取

沉淀蛋白的溶剂：

有机溶剂：乙腈、甲醇

强酸：三氯乙酸、过氯酸

盐：50%硫酸铵、10%TCA

分析测定用试剂为色谱纯及以上，水为超纯水

第二部分：实验设计

1、考虑问题：动物种属、给药剂量、取血时间、采样量、血药浓度

大概范围

2、分析方法建立：色谱柱、流动相组成、柱温箱温度、样品处理方

法、风量下限与标曲范围

第三部分：实验相关条件与数据处理

实验一：

1、采血点设计一般原则

为获得给药后的一个完整的血药浓度-时间曲线，采样时间点的

设计应兼顾药物的吸收相、平衡相（峰浓度附近）和消

除相。一般在吸收相至少需要2~3个采样点，对于吸收

快的血管外给药的药物，应尽量避免第一个点是峰浓度

（Cmax）；在Cmax附近至少需要3个采样点；消除相需

要4~6个采样点。整个采样时间至少应持续到3~5个半

衰期，或持续到血药浓度为Cmax的1/10~1/20。为保证

最佳