一次性使用医疗用品产品细菌和真菌污染的检测.docx

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一次性使用医疗用品产品细菌和真菌污染的检测

细菌或真菌污染总菌数的检测

目的

检测一次性使用医疗用品消毒后残存细菌或真菌状况，存放一定时间后是否被细菌或真菌污染及其污染的程。

适用范围

临床用于病人检查、治疗、护理用指套、手套、吸痰管、**窥镜、肛镜、印模托盘、治疗巾、皮肤清洁巾、擦手巾、压舌板、臀垫、中单等接触完整粘膜、皮肤的各类一次性使用医疗、护理用品。

试验器材

营养琼脂培养基：见附录A。

沙堡琼脂培养基（真菌培养用）：见附录A。

无菌检查用洗脱液：见附录A。

磷酸盐缓冲液（PBS，0.03mol/L，pH7.2）：见附录A。

（5）100级洁净室或100级层流超净工作台（下简称超净台）。

安全操作箱（用于防止真菌孢子污染周围环境）

刻度吸管（1.0mol、5.0mol）

抽样要求

抽样方法

为使样品具有良好的代表性，采用随机抽样方法。随机选取不同

3个批号的产品。根据检验要求，从每个批号产品中随机抽取同等数

量的样品，尽量选自多个大包装。不得在同一批号内的同一包装内邻近部位集中选取所需全部样品。

抽样数量

①对单一品牌、型别（或规格）产品鉴定取样：随机选取不同3个批号的产品。从每个批号产品中随机抽取3个大包装。从每个大包装中随机抽取20个最小销售包装产品（每个最小销售包装产品重量应达到10g以上；棉签等每个包装内数量达到5支以上，以满足检验最低需要量。如果重量低于10g或数量少于5支时，适当增加抽取产品的最小销售包装数量。）作为该品牌、批号产品抽检样品。其中1/4样品用于首次检测，1/4样品用于留样，2/4样品用于必要时的复测。样品最小销售包装应完整无破损（包装破损即可视为不合格产品、禁止出售），检测前不得开启。

②对同一品牌、不同型别（或规格）产品鉴定取样：分别对不同型别（或规格）产品进行随机抽检。对每个型别（或规格）产品随机选取不同3个批号产品。从每个批号产品中随机抽取3个大包装。以下步骤同2.1.9.1.4（2）①。

③对不同一品牌、不同一型别（或规格）产品鉴定取样：分别对不同品牌、型别（或规格）产品进行随机抽检。对每个品牌的每一个型别（或规格）产品随机选取不同3个批号的产品。从每个批号产品中随机抽取3个大包装。以下步骤同2.1.9.1.4（2）①。

检测样本的制作

检测数量

①每批样品首次检测时，检测5个样本，分别在所选的5个最小销售包装内抽取。

②必要时进行复测。复测时，检测10个样本，分别在所选的10个最小销售包装内抽取。

③以下的样本制作均按首次检测设计，复测时样本量加倍。

样本制作

①垫单、手套等产品的样本制作：分别在所选5个最小销售包装内样品的不同部位剪取10g重样片。共5份。分别剪碎后，各放入一含100ml洗脱液试管中，震荡20s或振打80次。待样本碎片沉淀后，取各管洗液分别进行检测。

②指套等小件物品的样本制作：在所选5个最小销售包装内样品中各选一个样本，共5份。分别剪碎后，各投入含10ml洗脱液试管中，每管一个样本。震荡20s或振打80次，取各管洗液分别进行检测。

③棉签.在所选5个最小销售包装内样品中，各选5支为一个样本，共5份。分别直接投入含10ml洗脱液试管中，每管一个样本。震荡20s或振打80次，取各管洗脱液分别进行检测。

④对不能用上述方法采样的物品，在所选5个小包装中各选一个样本。共5份。分别用无菌棉拭子涂抹法采样。每样本涂抹采样面积25cm。采样后，按无菌操作原则剪下棉拭采样端置于10ml采样液试管中，每管一份样本。震荡20s或振打80次，取各管采样液分别进行检测。

细菌检测操作程序

样本制备后，应立即进行检测。

每一样本洗脱液或采样液接种2个平皿，每个平皿接种1.0ml。当估计含菌量过高时（每平板生长菌落数超过300个），应用PBS对洗脱液或采样液作适当稀释后再接种。为取得适宜的菌落数，应接种2个～3个不同稀释度样液。每吸取一个稀释度样液，换一支无菌吸管。

将45℃左右融化的营养琼脂培养基倾注于已加入样液的平皿中。每平皿约15ml～20ml。盖好、与样液混均、平放。待培养基凝固后，翻转平板使底向上，置37℃恒温培养箱内培养48h后，计数菌落数。

菌落数计算：接种洗脱液或采样液原液进行培养者，即使生长的菌落数lt;15cfu/平板时，仍按实际生长菌落数计算；接种不同稀释度洗脱液或采样液进行培养时、应选择生长的