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第三章色谱分析法导论
Chromatography
Chromatography
3.1概述
3.2色谱流出曲线
3.3色谱法基本原理
3.4色谱定性和定量分析
3-1概述
色谱法的产生
1906年,俄国植物学家茨维特
在分离植物叶子中的色素时,将叶
片的石油醚(饱和烃混合物)提取
液倒入一根装有CaCO粉末的竖直玻
3
璃管中,再加入纯的石油醚任其自
然流下,一会儿柱中出现不同颜色
的谱带,植物浸取液中的色素得到
了分离。
§色谱法:一种重要的分离分析方法,混合物在流动
相的携带下通过色谱柱分离出几种组分的方法。
§色谱法中包含两相
固定相—固定不动的相CaCO
3
流动相—推动混合物流动的液体石油醚
1、按两相状态分类
气固色谱GSC-固体吸附
气相色谱(GC)
气液色谱GLC-液体
液固色谱LSC-固体吸附
液相色谱(LC)
液液色谱LLC-液体
超临界流体色谱(SFC)
2、按操作形式分类
(1)柱色谱:固定相装在柱管内的色谱法。
(2)纸色谱:滤纸为固定相的色谱法,流动
相是含一定比例水的有机溶剂,样品在滤纸
上展开进行分离。
(3)薄层色谱:把固体固定相压成或涂成薄
膜的色谱法。
3、按分离原理分类
(1)吸附色谱:利用吸附剂表面对被分离的各组分
吸附能力不同进行分离。
(2)分配色谱:利用固定液对各组分的溶解能力不
同进行分离。
(3)离子交换色谱:利用离子交换剂对各组分的亲
和力不同进行分离。
(4)凝胶色谱:利用凝胶对分子的大小和形状不同
的组分所产生的阻碍作用不同而进行分离的色谱法。
§3-2色谱图及色谱常用术语
一、色谱图
二、色谱图中的基本术语
1、基线—在实验操作条件下,色谱柱后没有
样品组分流出的曲线称为基线。稳定的基
线应该是一条水平直线。
2、峰高—色谱峰顶点与基线之间的垂直距离,
以(h)表示。峰高低与组分浓度有关,峰
越高越窄越好。
3、色谱峰的宽度
•标准偏差σ—峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。
•半峰宽Y—峰高一半处对应的峰宽。
1/2
Y1/2=2.354σ
•基线宽度Y—色谱峰两侧拐点所作切线在基线上
的距离。
Y=4σ
4、色谱峰面积A—色谱峰与峰底所围的面积。
5、色谱保留值—定性的依据
(1)死时间t——不被固定相吸附或溶解的组分流经
0
色谱柱所需的时间。
()保留时间t——组分流经色谱柱时所需时间。
R
(3)调整保留时间t——扣除了死时间的保留时间。
R
t=t-t
RR0
**t体现的是组分在柱中被吸附或溶解的时间,更合
R
理的反映了被测组分的保留特性。
(5)死体积V——指色谱柱在填充后
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