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尿中甲基乙酰胺的气相色谱测定方法
编制说明
1.编制经过
“尿中N-甲基乙酰胺生物限值及气相色谱测定方法”卫生标准制订项目由政策
司立项。2010年6月组成了由浙江省医学负责承担的“职业接触二甲基乙酰
胺的生物限值及气相色谱测定方法”课题研制组。在充分收集和分析国内外现有资料的基础上,
经现场调研、方法研究、三家单位的方法验证、资料整理,于2011年5月完成征求意见
初稿。征求了16位专家的意见,在汇总分析专家意见的基础上,对征求进行了认真
的修改,于2011年7月上旬参加职业卫生标准专业组织的专家审稿会,8月份将完
制定的依据作如下说明。
2.国内外慨况
2.1ACGIH(1993年)颁布工作周末的班末尿中甲基乙酰胺(N-MethylacetamideNMAC)的
BEI值为30mg/gCr,德国DFG(2001年)颁布BAT值为30mg/gCr[1]。我国推荐工作周末的
班末尿中NMAC为20mg/gCr。(正在中)
2.2国内尿中NMAC的测定方法本标准主要起草人已作了[2],NIOSH、德国、、俄罗
斯等也未制定其标准测定方法。本方法属于国内创新。
3.方法研究内容及结果
3.1理化性质:NMAC的CAS号为79-16-3,分子式:CHNO,分子量:
3773.09,为白色针状结
晶。26-28ºC,沸点204-206℃,相对密度0.9571(25/4℃),折光率1.4301,闪点108℃。
[3]
溶于水、甲醇、苯、醚、氯仿,不溶于石油醚。在尿中NMAC较稳定,可较长时间保存。
3.2尿中NMAC是二甲基乙酰胺(DMAC)在体内的主要代谢产物,尿中NMAC含量在一个工作
逐渐升高,工作周末的班末尿中最高[4,5]。工作周末的班末尿中NMAC含量与作业场所空气中DMAC成
正相关。因此,国内外一致公认:检测周末的班末尿中NMAC作为接触DMAC生物特异性指
标
[4,6,7,8,9]
。
3.3样品处理方法的采用理由:尿样中含有许多高沸点、大分子杂质,多次进样后会污染毛细管
柱,进而导致色谱柱性能降低,色谱峰变宽,灵敏度降低。本法将新的尿样置于-18℃冰箱
迅速冷冻,检测前先室温解冻,混匀后通过3000r/min离心(10min)分离除去部分在水中溶解性差
的弱极性杂质,再选择能与NMAC混溶的甲醇为蛋白沉淀剂,试验了在尿样中添加50、60、70、80%
的甲醇,结果表明甲醇比例愈高,析出的沉淀愈多。最终选择样品测定液中甲醇和尿的比例为4:
1(相当于尿样稀释5倍),以除去的干扰杂质,减少水份的注入量,保护色谱柱和检测器,提高
分析的重现性。
3.4检测器的选择:鉴于NMAC分子中含有氮原子,选择了氮磷检测器(NPD),可获得更高的灵
敏度、更好的选择性,以满足尿中NMAC生物检测要求。目前氢火焰
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