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猪萨佩罗病毒病诊断技术规范

1范围

本文件规定了猪萨佩罗病毒病的临床诊断及病毒分离与鉴定、RT-PCR、TaqMan实时荧光定量PCR、

酶联免疫吸附试验（ELISA）等实验室诊断方法的技术要求。

本文件适用于猪萨佩罗病毒病的诊断、检测、检疫、监测和流行病学调查。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

猪萨佩罗病毒PorcineSapelovirus，PSV

单股正链RNA病毒，属于小RNA病毒科萨佩罗病毒属。该病毒能引起中度或严重的神经系统紊

乱、腹泻、繁殖障碍和肺炎，感染猪康复后仍然会继续排毒，成为重要的病毒传播源，因此该病毒在猪

群中感染率很高，严重威胁养猪业的健康发展。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

bp：碱基对（basepair）

BSA：牛血清白蛋白（bovineserumalbumin）

cDNA：互补DNA（complementaryDNA）

CPE：致细胞病变效应（cytopathiceffect）

Ct值：循环阈值（cyclethreshold）

DEPC：焦碳酸二乙酯（diethylpyrocarbonate）

DMEM：细胞培养液（dulbecco’smodifiedeaglemedium）

DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid）

ELISA：酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay）

ST：猪睾丸细胞（swinetestiscell）

MEM：最低必需培养液（minimalessentialmedium）

1

OD：光密度（opticaldensity）

PBS：磷酸盐缓冲液（phosphatebufferedsaline）

PBST：含吐温-20的磷酸盐缓冲液（phosphate-bufferedsalinewithtween-20）

PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）

PSV：猪萨佩罗病毒（porcinesapelovirus）

RNA：核糖核酸（ribonucleicacid）

RT：反转录（reversetranscription）

5临床诊断

5.1流行病学

PSV对各年龄段的猪均有易感性。家猪和野猪是已知的唯一的PSV宿主。病猪、患病猪以及隐性

感染的家猪和野猪是该病主要的传染源。该病主要经粪-口途径传播，一年四季均可发生，冬春季节多

发。在国内，该病毒在不同地区猪场的阳性检出率为6.52%~59%。且该病毒易与其它肠道病毒造成混

合感染。

5.2临床症状

发病猪常表现腹泻、肺炎及以共济失调和肢体瘫痪为特征的脊髓灰质炎综合征的症状，且母猪出现

屡配不孕或妊娠母猪流产、产仔不足、死胎、木乃伊胎和畸形胎等不育症。患病猪出现上述临床症状时，

可作为综合诊断的判断标准之一。

5.3病理变化

小肠上皮细胞坏死，绒毛萎缩；脑膜增厚，脑内充血，脑组织出现非化脓性脑炎；肺部病变较为明

显，肺泡间隔增宽、肺泡壁出现扩张现象，并且部分肺泡壁出现破裂现象，肺间质血管高度扩张充血。

组织学检查可见小肠绒毛明显脱落，固有层出血；神经细胞空泡化和血管袖套现象；肺组织红细胞浸润

间质，肺泡及肺泡壁变薄的明显肺泡扩张。

5.4结果判定

易感动物符合5.1且出现5.2临床症状、5.3病理变化时，可以初步判定为PSV疑似病例，确诊需要实

验室诊断。

6实验室鉴定

6.1病毒的分