GB_T 15805.4-2018斑点叉尾鮰病毒病诊断规程.docxVIP

ICS65.020.30B41

中华人民共和国国家标准

GB/T15805.4—2018代替GB/T15805.4—2008

斑点叉尾鮰病毒病诊断规程

Codeofdiagnosisforchannelcatfishvirusdiseases

2018-07-13发布2019-02-01实施

国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会

发布

Ⅰ

GB/T15805.4—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准代替GB/T15805.4—2008《鱼类检疫方法第4部分:斑点叉尾鮰病毒(CCV)》。本标准与GB/T15805.4—2008相比,除编辑性修改外,主要技术变化如下:

—增加了斑点叉尾鮰病毒病的临床症状描述;

—增加了酶联免疫吸附试验检测斑点叉尾鮰病毒抗原的方法;—改为酚氯仿法抽提病毒核酸;

—PCR检测增加内控DNA,长度为186bp;

—增加了资料性附录C“斑点叉尾鮰病毒病(CCVD)”。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国农业农村部提出。

本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口。

本标准起草单位:全国水产技术推广总站、中国检验检疫科学研究院、北京出入境检验检疫局。本标准主要起草人:吕永辉、张旻、王娜、谷强、余卫忠、景宏丽、张利峰、徐晔、周毅。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为:—GB/T15805.1—1995;

—GB/T15805.4—2008。

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GB/T15805.4—2018

斑点叉尾鮰病毒病诊断规程

1范围

本标准规定了斑点叉尾鮰病毒病临床症状、组织病理学特征、病毒分离、中和试验、酶联免疫吸附试验检测和聚合酶链式反应检测的方法。

本标准适用于斑点叉尾鮰病毒病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T18088出入境动物检疫采样

SC/T7016.8鱼类细胞系第8部分:斑点叉尾鮰卵巢细胞系(CCO)SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范

3缩略语

下列缩略语适用于本文件。bp:碱基对(basepair)

CCO:斑点叉尾鮰卵巢细胞(channelcatfishovarycellline)CCV:斑点叉尾鮰病毒(channelcatfishvirus)

CCVD:斑点叉尾鮰病毒病(channelcatfishvirusdisease)CPE:细胞病变效应(cytopathiceffect)

dATP:脱氧腺苷三磷酸(deoxyadenosinetriphosphate)dCTP:脱氧胞苷三磷酸(deoxycytidinetriphosphate)

dGTP:脱氧鸟苷三磷酸三钠(deoxyaguanosinetriphosphate)DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)dTTP:脱氧胸苷三磷酸(deoxythymidinetriphosphate)

EB:溴化乙啶(ethidiumbromide)

EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid)

ELISA:酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbentassay)FBS:胎牛血清(fetalbovineserum)

IgG:免疫球蛋白G(immunoglobulinG)OD:光密度(opticaldelnsity)

OPD:邻苯二胺(o-phenylenediamine)

PBST:磷酸盐吐温缓冲液(phosphatebuffersolution-tween-20)PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)

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GB/T15805.4—2018

Taq:水生栖热菌(thermusaquaticus)

TBE:三羟甲基氨基甲烷硼酸乙二胺四乙酸缓冲液(