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生物化学与分子生物学重点讲解

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第一章绪论

一、生物化学的的概念：

生物化学：氢键、疏水键、范德华力、离子键等，也可涉及二硫键。

4.四级结构：指亚基之间的立体排布、接触部位的布局等，其维系键为非共价键。亚基是指参与组成蛋白质四级结构的而又具有独立三级结构的多肽链。

五、蛋白质的理化性质：

.两性解离与等电点：蛋白质分子中仍然存在游离的氨基和游离的竣基，因此蛋白质与氨基酸一样具有两性解离的性质。蛋白质分子所带正、负电荷相等时溶液的pH值称

为蛋白质的等电点。

.蛋白质的胶体性质：蛋白质具有亲水溶胶的性质。蛋白质分子表面的水化膜和表面电荷是稳固蛋白质亲水溶胶的两个重要因素。

.蛋白质的紫外吸收：蛋白质分子中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸残基对紫外光有吸收，以色氨酸吸收最强，最大吸收峰为280ns

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六、蛋白质的分离与纯化：

.盐析与有机溶剂沉淀：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出,称为盐析。经常使用的中性盐有：硫酸镂、氯化钠、硫酸钠等。盐析时，溶液的pH在蛋白质的等电点处成效最好。凡能与水以任意比例混合的有机溶剂，如乙醇、甲醇、丙酮等，都可引发蛋白质沉淀。

.电泳：蛋白质分子在高于或低于其pl的溶液中带净

的负或正电荷，因此在电场中能够移动。电泳迁移率的大小要紧取决于蛋白质分子所带电荷量和分子大小。

.透析：利用透析袋膜的超滤性质，可将大分子物质与小分子物质分离开。

.层析：利用混合物中各组分理化性质的不同，在彼此接触的两相之间的散布不同而进行分离。要紧有离子互换

层析，凝胶层析，吸附层析及亲和层析等，其中凝胶层析可用于测定蛋白质的分子量。

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七、氨基酸顺序分析：

蛋白质多肽链的氨基酸顺序分析，即蛋白质一级结构的测定，要紧有以下几个步骤：

1,分离纯化蛋白质，取得必然量的蛋白质纯品；

2,取必然量的样品进行完全水解，再测定蛋白质的氨基酸组成；

3.分析蛋白质的N-端和C-端氨基酸；

4,采纳特异性的酶或化学试剂将蛋白质处置为假设干条肽段；

5,分离纯化单一肽段；

6,测定各条肽段的氨基酸顺序。一样采纳Edman降解法，用异硫匐酸苯酯进行反映，将氨基酸降解后，一一进行测定；

7,至少用两种不同的方式处置蛋白质，别离取得其肽

段的氨基酸顺序;

8,将两套不同肽段的氨基酸顺序进行比较，以取得完整的蛋白质分子的氨基酸顺序。

第三章核酸的结构与功能

一、核酸的化学组成：

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.戊糖：核甘酸中的戊糖要紧有两种，即B-D-核糖与B-D-2-脱氧核糖，由此组成的核甘酸也分为核糖核甘酸与脱氧核糖核酸两大类。

.核昔：核昔是由戊糖与含氮碱基经脱水缩合而生成的化合物。一般是由核糖或脱氧核糖的C1B-羟基与喀陡碱N1或喋吟碱N9进行缩合，故生成的化学键称为B,N糖

昔键。其中由D-核糖生成者称为核糖核昔，而由脱氧核糖生

成者那么称为脱氧核糖核甘。由“稀有碱基”所生成的核昔称为“稀有核昔”。假尿昔确实是由D-核糖的C1与尿喀院的C5相连而生成的核昔。

二、核昔酸的结构与命名：

核昔酸是由核昔与磷酸经脱水缩合后生成的磷酸酯类化合物，包括核糖核甘酸和脱氧核糖核酸两大类。最多见的核昔酸为5-核昔酸。5-核昔酸又可按其在5位缩合的磷酸基的多少，分为一磷酸核昔、二磷酸核昔和三磷酸核昔。

另外，生物体内还存在一些特殊的环核昔酸，常见的为环一磷酸腺昔和环一磷酸鸟昔，它们一般是作为激素作用的第二信使。

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三、核酸的一级结构：核昔酸通过3,5-磷酸二酯键连接起来形成的不含侧

链的多核甘酸长链化合物就称为核酸。核酸具有方向性，5

-位上具有自由磷酸基的结尾称为5-端，3-位上具有自

由羟基的结尾称为3-端。

DNA由dAMPdGMPdCM济口dTMP四种脱氧核糖核昔酸

所组成。DNA的一级结构确实是指DNA分子中脱氧核糖核昔酸的种类、数量、排列顺序及连接方式。RNA由AMPGMP

CMPUM四种核糖核昔酸组成。RNA勺一级结构确实是指RNA

分子中核糖核甘酸的种类、数量、排列顺序及连接方式。

四、DNA勺二级结构：

DNA双螺旋2^构是DNA二级结构的一种重要形式，它是Watson和Crick两位科学家于1953年提由来的一种结构模型，具要紧实验依据是Chargaff研究小组对DNA的化学组成进行