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生物化学实验课后练习

生物化学实验部分练习（仅供参考）

填空题

氨基酸分离的纸层析法是利用不同的氨基酸在展层剂中分配系数不同而得以分离的一种方法。

用纸层析法分离氨基酸要经过滤纸定点、点样、展层、显色、描点和计算等主要步骤。

纸层析法分离氨基酸中层析溶剂由有机溶剂和水组成，滤纸及其结合水称为固定相,有机溶剂称为流动相。

氨基酸的纸层析法在展层时，滤纸应缝成筒状，纸的两边不能接触，点样的一端应放在下方，扩展剂的液面应低于点样线。

用纸层析法分离氨基酸的过程中，喷显色液时，要喷得均匀，且不能流泪。

Rf值是表示氨基酸在层析图谱上的位置，简称比移值，它是指原点到层析点中心距离和原点到溶剂前缘距离的比值。

卵清蛋白液在碱性条件下，和CuSO4反应，可生成紫玫瑰色的化合物。

氨基酸和蛋白质分别与茚三酮反应都能生成蓝紫色的化合物。

头发、指甲、大豆提取液等中含有苯环氨基酸，所以遇硝酸后可被消化成黄色的硝基酚物质。

用AgNO3、（NH4）2SO4、乙醇沉淀蛋白质，反应最快的是AgNO3。

尿蛋白定性检验时，加热后有沉淀产生，如加入醋酸后仍不溶解，可判断为尿中含有蛋白质，如加入醋酸后消失，即为盐分。

血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验需要的主要仪器是电泳议和电泳槽；用醋酸纤维薄膜作为支持物；点样时，样品应点在薄膜的无光泽面上。电泳时，点样端应靠近负极；点样处不能与滤纸桥重叠。

正常人血清蛋白在电泳图谱上的排列顺序（从远离点样端开始）为血清清蛋白、α1－球蛋白、α2－球蛋白、β－球蛋白、γ－球蛋白。

考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定

考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度的操作步骤主要包括标准曲线的制作、样品中蛋白质含量的测定以及样品蛋白质含量计算。

生物化学实验课后练习全文共1页，当前为第1页。酵母中含核糖核酸较多，而脱氧核糖核酸较少，因而酵母是制备RNA的好材料。

生物化学实验课后练习全文共1页，当前为第1页。

酵母RNA的碱提取液中加入酸性乙醇可使解聚的核糖核酸沉淀。

RNA含有核糖、磷酸和碱基等组分，可分别用苔黑酚、定磷试剂和AgNO3等试剂进行检验，分别产生绿色、蓝色和絮状化合物。

DNA在生物体中主要以DNA核蛋白的形式存在，它易溶于

高浓度盐(1mol/LnaCl)溶液中。

在提取DNA时，加入SDS(十二烷基硫酸钠)可以引起蛋白质变性，也可使核酸降解酶破坏，从而起到保护DNA的作用。加入氯仿-异戊醇可将蛋白质沉淀除去；加入乙醇可以沉淀DNA。

用肝脏提取DNA时，在最后离心后可分成三层，其中上层含有DNA，中、下层含的是细胞碎片、蛋白质以及有机溶剂，应弃去。

DNA中的脱氧核糖在酸性溶液中与二苯胺试剂作用生成蓝色化合物,在DNA浓度为20~200ug/ml范围内,吸光度与浓度成正比,在波长为595nm下进行比色测定。

糖在高温条件下，被硫酸作用生成糠醛或糠醛衍生物后与蒽酮缩合成

兰色物，在620nm处有最大吸收。溶液含糖量在150ug/mL以内，与蒽酮反应生成的颜色深浅与糖量成正比。

过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA）可与硫代巴比妥酸（TBA）缩合，形成红色产物，在532nm处有最大吸收峰。

淀粉在淀粉酶的催化下，水解产生的系列中间产物有兰糊精、紫糊精、红糊精、黄糊精和无色糊精等，他们与碘作用产生的颜色分别是蓝色、紫色、红色、黄色和无色（或碘色）。

唾液淀粉酶的最适温度为370C，最适PH为7.0。

酶的活性受活化剂或抑制剂的影响，Cl－为唾液淀粉酶的活化剂，Cu2＋为唾液淀粉酶的抑制剂。

淀粉酶能专一性地作用于淀粉，蔗糖酶能专一性作用于蔗糖。这可用班乃迪试剂检验，通过观察是否有红黄色化合物的出现加以判断，从而得出结论。

小麦萌发后的酶活力较萌发前的活力高，萌发3天后的酶活力较萌发1天的活力高。

血清中含有谷丙转氨酶，能催化α－酮戊二酸与丙氨酸进行转氨反应。

问答题