《生物化学》课件-酶学.pptxVIP

第三章酶学;目录;第一节酶的概念及作用特点;酶及生物催化剂概念的发展;酶专一性类型;绝对专一性和相对专一性;消化道内几种蛋白酶的专一性;消化道蛋白酶作用的专一性

;据酶分子组成分类;第二节酶的命名和分类（略讲）;第三节酶催化作用的结构基础和

高效催化的策略

;酶催化的中间产物理论;二、酶的活性中心

;Asp;;差示标记法图解;亲和标记法

;三、酶作用专一性机理;;;四、酶高效催化的策略

;酶分子中可作为亲核基团和酸硷催化的功能基团;;差示标记法图解;;;;溶菌酶底物D环变形模型

;溶菌酶催化反应机理;;;;羧肽酶活性中心的共价催化机理

;羧肽酶活性中心的共价催化机理

;;;;胰凝乳蛋白酶分子中催化三联体构象;胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（1）;胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（2）;第四节酶促反应的动力学

;酶促反应速度的测定与酶的活力单位

;酶促反应初速度的概念;酶活力测定方法

;

酶活力的表示方法

;2、底物浓度对酶反应速度的影响;;米氏方程的三个假设

中间产物学说：

E+SESE+P

（1）反应开始，[P]很低，由P+EES可忽略不计，即：

E+SESE+P;（2）E+SES为快速反应(快速平衡假说)

（3）ESE+P为慢速反应(限速步骤),

反应速度v决定于最慢的一步即K3;米氏方程推导过程

E+SESE+P

[E][S][ES][E]

游离酶浓度[E]=[E]t－[ES]

ES生成速度v1=k1[E][S]

ES分解速度v2=k2[ES]+k3[ES]

当稳态时：ES生成速度=ES分解速度

v1=v2

k1[E][S]=k2[ES]+k3[ES]＝(k2+k3)[ES];∴[E][S]k2+k3

[ES]k1;整理得：;当所有的酶被底物饱和时，所有的酶都以ES形式存在，即[Et]=[ES]，此时即达到最大反应速度Vmax。所以

Vmax=k3[Et](6)

将（6）代入（5）即得：;米氏常数的意义;米氏常数的测定

;;3、pH对酶反应速度的影响;;5、激活剂对酶作用的影响;6、抑制剂对酶作用的影响;抑制剂类型和特点;;;反竞争性抑制作用;;;非竞争性抑制曲线;反竞争性抑制曲线

;有无抑制剂存在时酶促反应的动力学方程

;非专一性不可逆抑制剂

;专一性不可逆抑制剂

;专一性不可逆抑制;例子;用自杀性底物对付抗青霉素的菌株;青霉素分子;对青霉素酶具有抑制作用的青霉素产品;cefoxitin，先锋霉素(或称为头抱菌素）类抗生素，其结构为:;第五节重要的酶类及酶活性的调节控制

;一、多酶体系和多酶复合体;二、酶的别构（变构）效应和别构酶;酶的别构（变构）效应示意图;;1--非调节酶

2--正协同别构酶

3--负协同别构酶;;;ATCase的半分子结构;;;;别构酶的序变模型;别构酶的齐变模型;三、酶的共价修饰;蛋白质的磷酸化和脱磷酸化

;;级联系统调控糖原分解示意图;四、酶原的激活

;;;五、酶的多种分子形式——同工酶

;乳酸脱氢酶同工酶形成示意图

;不同组织中LDH同工酶的电泳图谱;;同工酶在各学科中的应用

;六、抗体酶;;基因工程抗体酶的制备;抗体酶的筛选;抗体酶的研究和应用前景;第六节酶工程简介;固定化酶

;溴化氰亚氨碳酸基偶联法;戊二醛交联法;酶的改造和模拟;人工模拟酶?-benzyme

;生物酶工程示意图

;问答题;