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罗氏免疫组化染色机染色流程
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罗氏免疫组化染色机是一种用于生物学实验室的自动化设备,主要用于组织
和细胞样本的免疫组化染色。以下是罗氏免疫组化染色机的一般染色流程:
1.样本准备
在染色前,首先需要对样本进行固定和脱水处理。通常使用甲醛或乙醇
对组织样本进行固定,然后通过一系列的酒精梯度进行脱水。
2.抗原修复
将脱水后的组织样本放入抗原修复液中,加热至一定温度,以打开组织
中的抗原决定簇,使其暴露出来,便于抗体识别。
3.阻断
将抗原修复后的组织样本放入阻断液中,以阻断非特异性结合位点,减
少背景染色。
4.免疫染色
将阻断后的组织样本与一抗(特异性抗体)在适宜的温度下孵育,使抗
体与目标抗原结合。然后用洗涤液清洗样本,去除未结合的抗体。
5.增强
将二抗(带有酶标记的抗体)与组织样本孵育,使二抗与一抗结合。洗
涤后,可以使用底物显色液进行显色反应。
6.显色
将显色液加入组织样本中,经过一段时间的孵育,酶标记的二抗会将底
物分解,产生颜色变化,从而实现目标抗原的显色。
7.清洗
用洗涤液清洗样本,去除多余的显色液和酶标记抗体。
8.终止
加入终止液,终止显色反应,防止颜色继续加深。
9.观察
将染色后的组织样本放置在显微镜下观察,根据颜色和形态等特征判断
染色结果。
注意事项:
1.在整个染色过程中,需要严格遵循实验室生物安全操作规程,佩戴适当
的个人防护装备。
2.确保染色过程中所使用的试剂和仪器均符合要求,避免影响染色效果。
3.染色过程中,需要严格控制温度、孵育时间和洗涤次数,以确保染色效
果的稳定性和重复性。
4.在处理样本时,避免触摸样本的抗原部位,以免影响染色结果。
5.染色结束后,及时清洗设备,确保设备处于良好的工作状态。
6.定期对设备进行维护和校准,确保染色效果的准确性。
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