蛋白质化学氨基酸.ppt

**************（二）紫外吸收性质：只有芳香族氨基酸有紫外吸收能力Lambert-Beer定律紫外区（200—400nm）：Tyr/Trp/Phe原因：-C=C-C=C-C=C-C=C-第63页,共94页，星期六，2024年，5月第64页,共94页，星期六，2024年，5月Trp280nmTyr275nmPhe257nm蛋白质含量测定280nm第65页,共94页，星期六，2024年，5月（三）化学性质1、氨基酸的两性性质和等电点氨基酸是两性电解质，其解离方式和程度取决于所处溶液的酸碱度。(1)等电点(isoelectricpoint,pI)在某一pH溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。氨基酸等电点的特点：净电荷为零，在电场中不移动；此时氨基酸的溶解度最小。第66页,共94页，星期六，2024年，5月pH=pI+OH-pHpI+H++OH-+H+pHpI氨基酸的兼性离子阳离子阴离子第67页,共94页，星期六，2024年，5月(2)等电点pI计算公式氨基酸的pI是由α-羧基和α-氨基的解离常数的负对数决定的。对侧链R基不解离的中性氨基酸来说：pI=1/2（pK1+pK2)pK1为α-羧基的解离常数pK2为α-氨基的解离常数第68页,共94页，星期六，2024年，5月中性氨基酸：以Gly为例K1=[Gly±][H+][Gly+]K2=[Gly-][H+][Gly±]pI时，[Gly+]=[Gly-][Gly±][H+]K1=[Gly±]K2[H+][H+]2=K1K2pH=（pK1+pK2）/2pI=（pK1+pK2）/2pI=（2.34+9.60）/2=5.97Gly第69页,共94页，星期六，2024年，5月②酸性氨基酸的pI(Asp)第70页,共94页，星期六，2024年，5月③碱性氨基酸的pI(Lys)第71页,共94页，星期六，2024年，5月氨基酸的pI酸性氨基酸：pI=(两个小的pK值)/2碱性氨基酸：pI=(两个大的pK值)/2侧链不含离解基团的中性氨基酸，其等电点是它的pK′1和pK′2的算术平均值；对于侧链含有可解离基团的氨基酸，其pI值也决定于两性离子两边的pK′值的算术平均值。中性氨基酸：pI=(pK′1+pK′2)/2所以，等电点的pH与离子浓度无关，其值取决于两性离子两边的pK值。处于等电点时的氨基酸溶解度最小，导电性最小，粘度、渗透性最小。第72页,共94页，星期六，2024年，5月在等电点以上的任何pH，氨基酸带净负电荷，在电场中将向正极移动；结论：在低于等电点的任何pH，氨基酸带净正电荷，在电场中将向负极移动。在一定pH范围内，氨基酸溶液的pH离等电点愈远，氨基酸所携带的净电荷愈大。氨基酸的酸碱性质第73页,共94页，星期六，2024年，5月以弱酸HA为例，其解离常数为KaKa=[H+][A-]/[HA]两边取对数：lgKa=lg[H+]+lg([A-]/[HA])由于-lgKa=pKa所以pKa=pH-lg([A-]/[HA])=pH+lg([HA]/[A-])故溶液pH=pKa+lg([A-]/[HA])=pKa+lg(碱/共轭酸)[A-]和[HA]互为共轭酸碱对，即[A-]为[HA]的共轭碱，反过来，[HA]是[A-]的共轭酸，可以用来估算缓冲体系的pHHAA-+H+亨德森-哈塞尔巴尔赫(Henderson-Hasselbalchd)方程第74页,共94页，星期六，2024年，5月例题：Gly的-NH3+有1/3解离时，溶液的pH值？pH=pK2+lg([Gly-]/[Gly0])pH=9.6+lg(1/2)pH=9.3第75页,共94页，星期六，2024年，5月（三）AA的化学性质氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm处。由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系，因此可作为氨基酸定量分析方法。2、氨基酸的化学反应（1）茚三酮反应与α-NH2、α-COOH和R侧链