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动物基因扩增实验室布局与运行技术标准
1范围
本文件规定了动物基因扩增实验室布局与运行技术标准操作方法及注意事项。
本文件适用于动物医院或动物第三方临床检验实验室开展目前临床需求的常规基因检测项目。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1动物基因扩增GeneAmplificationforAnimals
应用PCR技术等手段,对动物体内的DNA进行检测,以辅助诊断动物遗传性疾病、感染性疾病
等。
4基本要求
4.1一般要求
动物基因扩增实验室的建设标准适用于动物临床检测、动物医学研究、动物药品研发等场景,通过
PCR技术等方法对动物的基因进行扩增和检测,从而实现对动物的遗传信息和疾病状态等方面的研究
和诊断。
4.2建设要求
4.2.1区域划分明确
基因扩增检验实验室原则上分为四个独立的工作区域,包括试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增
区、扩增产物分析区。每个区域都要有明确的标识,并配备相应的专用设备和设施。动物基因扩增实验
室通常使用全自动分析仪(扩增产物闭管检测),该场景下扩增区及扩增产物分析区可做合并。
4.2.2遵循单一方向流动原则
为避免交叉污染,实验室内空气流向应遵循单一方向流动,即从试剂贮存和准备区到标本制备区,
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再到扩增区,最后到扩增产物分析区(如有)。
4.2.3通风和空气流向
各实验区域与缓冲间应保持一定的通风压力差,确保合理的空气流向,防止交叉污染。
4.2.4设备和材料
各实验区应配备必要的仪器和设备,如冰箱、混匀仪、微量加样器、紫外灯、生物安全柜等,以及
专用的消耗品和工作服等。
5实验室布局及建设
5.1功能分区明确
动物基因扩增实验室分为四个主要工作区域:
5.1.1试剂贮存和准备区
存储试剂和制备实验所需的物品,如有阳性质控品,拆包后建议及时转移至标本制备区。
5.1.2标本制备区
进行样本的准备和提取处理。
5.1.3扩增区
配置PCR反应混合物并进行扩增反应;扩增反应体系的配置和提取核酸的加入亦可在标本制备区
进行,关键是要防止扩增产物的污染。
5.1.4扩增产物分析区
分析扩增后的产物。
5.1.5其他
每个区域都必须有专用的仪器设备,各区必须有明确的界限和标识,不同工作区域的设备和耗材等
不得混用。
PCR实验室的功能区分布可分散,可集中布置;集中布置的分布原则是依次排列、独立分区。
如果使用全自动扩增分析仪,后两区可合并;如果使用核酸提取、扩增和产物分析一体化的全自动
分析系统,则后三区可合并。具体实验室分区应根据其所使用的技术平台、检验项目等需求而定。
5.2风向与气流控制
实验室内的气流应遵循单向流动,从试剂贮存区和准备区到标本制备区,再到扩增区,最后到扩增
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产物分析区,以防止交叉污染。同时注意确保实验室内的气压稳定。
5.2.1标准四区分离和气压调节
动物基因扩增实验室分为四个独立的实验区,整个实验区有一个完整的缓冲走廊。每个独立的实验
区域都配备缓冲区,每个区域都通过气压调节,用合理的气流方式避免各实验区域的交叉污染。
5.2.2压差设计
动物基因扩增实验室应设计成负压洁净室,通过压差控制,见表一。整个过程试剂和标本不受气溶
胶污染,并降低扩增产物对人员和环境的污染。各实验室与非洁净区之间的闸间保持正压,实验与闸间
之间的气流组织方向设置为:试剂贮存和准备区空气流向闸间,标本制备区流向闸间,而扩增区气流方
向由闸间流向扩增区。同时按照试剂单向流方向,各个实验室之间设计不同的压力梯度来实现单向气流
组织方向,由试剂贮存和准备区、标本制备区到扩增区压力逐渐降低,形成单向负压压力梯度。
表1压差设计表
分区压力温度相对湿度照明
走廊0Pa
缓冲间+5Pa
试剂贮存和准备区+15Pa
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