土壤质量从土壤样品中直接提取DNA的方法-编制说明.docx

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《土壤质量从土壤样品中直接中提取DNA的方法》

Soilquality-MethodtodirectlyextractDNAfromsoilsamples

国家标准（征求意见稿）

编制说明

《直接从土壤样本中提取DNA的方法》编制组

二0一九年一月

1、立项背景

1.1土壤DNA提取标准化的必要性

土壤微生物数量大、种类多，且99%以上的土壤微生物难以在实验室分离培养，因此，基于培养的传统微生物学方法用于土壤微生物研究时往往存在偏差。从复杂土壤环境中直接提取DNA并进行扩增分析的分子生物学方法，克服了土壤微生物不可培养的难题，能够实现微生物在原位土壤中的群落结构和代谢功能的准确解析。土壤DNA提取是土壤微生物多样性研究的基础。土壤DNA提取方法差异可能会对DNA提取效率、DNA质量和数量，甚至后续的研究性实验造成影响。因此，土壤DNA提取标准化是土壤微生物研究的关键。

从土壤中直接提取DNA的方法已形成国际标准。为了标准化从土壤中直接提取DNA方法，促进相关科学研究成果交流和我国土壤学科发展，制定《土壤质量直接从土壤样本中提取DNA的方法》的国家标准十分必要。

1.2国家及土壤质量主管部门的要求

标准是经济活动和社会发展的技术支撑，是国家治理体系和治理能力现代化的基础性制度。近年来我国标准化水平持续提升，但是与经济社会发展需求相比，仍存在一定差距。为提升国家标准化水平和实力，国家相继颁布了《中共中央关于制定国民经济和社会发展第十三个五年规划的建议》、《国务院关于印发深化标准化工作改革方案的通知》以及《国家标准化体系建设发展规划（2016-2020年）》。为加快完善土壤质量相关的标准化体系并提升标准化水平，“全国土壤质量标准化技术委员会”大力开展土壤质量标准化工作，制定适合我国土壤质量监测与分析的相关标准，逐步形成我国土壤质量标准化体系。

土壤是陆地生态系统的基础，土壤质量的好坏直接影响地上植物的产量质量、生态系统水环境和大气环境质量，关系到环境健康、粮食保障和食品安全等重大社会民生问题。近年来严峻的生态环境形势如耕地污染、土壤退化等问题频出，对土壤质量相关标准的完善也提出了紧迫的要求。2018年，国家标准化管理委员会审核通过并立项了“直接从土壤样本中提取DNA的方法”T-326）国家标准的制定。因此，根据国家标准制定工作的任务及土壤质量国家标准制定的需要，完成该标准的制订，对于指导我国土壤质量监测与监管有重要意义。

2、任务来源

2018年12月中国标准化管理委员会下达了《关于下达2018年第四批国家标准制修订计划的通知》（国标委发函[2018]83号），其中《土壤质量直接从土壤样品提取DNA的方法》获得批准成为2018年第四批国家标准制订计划项目，计划编号T-326，主管部门为农业农村部，技术归口单位为全国土壤质量标准化技术委员会，由中国科学院南京土壤研究所负责编制工作，中国科学院亚热带农业生态研究所、江苏省质量和标准化研究院、中国科学院南京土壤研究所参与编制工作。

3、标准制定的原则和主要内容

3.1原则

本标准使用翻译法等同采用ISO11063《Soilquality—MethodtodirectlyextractDNAfromsoilsamples》，形成我国《直接从土壤样本中提取DNA的方法》。

3.2技术路线

本标准的编写技术依据是GB/T1.1-2009《标准化工作导则第一部分：标准的结构和编写》和GB/T20000.2-2009《标准化工作指南第2部分：采用国际标准》。

保持标准内容和结构不变，但按照我国标准编制方法，去除了资料性概述要素，包括封面、目次、前言和引言，并进行了一些编辑性的修改。

3.3主要内容

本标准涉及的主要内容包括：范围、规范性引用文件、条款和定义、原理、测试材料、仪器、程序、土壤DNA质量和数量确定、提取程序验证、国际环测试、测试报告和附录。

本标准规定了从土壤样本直接提取DNA的程序，使用基于PCR扩增的技术分析土壤细菌群落和功能微生物群落的整体结构、丰度以验证土壤DNA提取结果。本方法能够有助于深入地认识微生物群落的丰富度及结构等土壤微生物多样性的关键指标，在不久的将来能够成为土壤环境微生物监测的常规工具。

本方法主要用于农业和森林土壤，可能适用于富含有机质的土壤（如泥炭土），以及被有机污染物或者重金属严重污染的土壤。另外，尽管进行DNA提取前，土壤会进行过筛（2mm网目），但是在土壤样本中依然会存在植物残体，因此，植物DNA残留可能会对土壤DNA提取结果以及后续分析造成污染。

4、标准中涉及专利的情况

本标准不涉及专利问题。

5、预期达到的社会效益等情况

土壤DNA提