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一种降糖复方中药提取液中总多糖含量的测
定
高伟,王晓娟,刘翊,杜连祥
【摘要】目的成立分光光度法测定降糖复方中药提取液中总
多糖的含量。方式紫外分光光度法,苯酚-硫酸法。结果该方式的线
性范围为5~40μg/ml,r=3,平均回收率为%,RSD=%。结论该方
式简便易行,重现性良好。
【关键词】复方降糖中药提取液;总多糖;紫外分光光度法;
含量测定
由黄芪、荔枝核、山楂叶、银合欢种子按必然的比例混合,
经必然的提取工艺加工取得的提取液,经药理实验说明,具有专门好
的降低血糖、调剂血脂的作用。多糖为其要紧有效成份之一。本文采
纳紫外分光光度法、苯酚-硫酸法对该提取液中的总多糖进行含量测
定,为其质量标准的研究与指标的制定提供实验依据。结果说明本法
简便灵敏快速易行,可用于操纵该产品的质量。
1仪器与试药
仪器核酸蛋白分析仪由广州雷得生物技术生产。
试药降糖复方中药提取液由本院自行制作;葡萄糖标准品:
中国药品生物制品查验所出品;浓硫酸、苯酚、乙醇均为分析纯。
2方式与结果
葡萄糖标准品溶液的制备周密称取105℃干燥至恒重的无
水葡萄糖标准品5mg,置100ml容量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至
刻度,摇匀,即得每毫升中含无水葡萄糖mg的溶液作为标准品溶液。
供试品溶液的制备降糖复方中药提取液的浓度为生药50
g/100ml,周密移取降糖复方中药提取液ml至离心管中,3500r/min
离心5min,搜集上清液至离心管中,加入10ml无水乙醇,3500r/min
离心10min,倾去上清液,所得沉淀水浴蒸干,加蒸馏水10ml,水
浴30min,转移至25ml容量瓶中,定容,备用。
最大吸收波长的确信[1]别离周密移取葡萄糖标准品溶液
30μl及供试品溶液30μl置于10ml具塞试管中,各加入蒸馏水
至1ml,然后各加入5%的苯酚溶液ml,摇匀,迅速加入浓硫酸ml,
振摇5min,滚水浴中加热15min,冰水浴中冷却30min,掏出。以
蒸馏水同上操作制备空白溶液。用核酸蛋白分析仪在200~700nm范
围内扫描,由扫描结果可知,葡萄糖标准品和供试品的最大吸收波长
均为485nm。
标准曲线的制备周密移取标准品溶液,,,,,ml别离置于
10ml具塞试管中,加水至1ml,别离加入5%的苯酚溶液ml,迅速
加入浓硫酸ml,振摇5min,滚水浴15min,冰水浴30min,掏出,
以第1份为空白,于核酸蛋白分析仪系统中,在485nm处测定吸光度,
结果见表1。
表1标准曲线的制备(略)
上述实验数据通过计算得回归方程:A=+8,r=3,结果说
明葡萄糖浓度在5~40μg/ml范围内线性关系良好。
稳固性实验按“”项方式操作,每隔30min对同一供试品
溶液测定吸光度一次,结果说明,供试液在3h内显色稳固,见表2。
表2稳固性实验结果(略)
重现性实验同一批样品,各周密吸取ml共5份,制备供
试品溶液,各周密吸取供试品溶液30μl,照标准曲线的制备项下方
式测定吸光度别离为,,,,,RSD为%(n=5)。说明本方式重现性良好。
周密度实验周密吸取同一供试品溶液30μl共5份,照标
准曲线的制备项下方式测定吸光度别离为,,,,,RSD为%(n=5)。
加样回收率实验在已知含量的同一批样品中,吸取样品溶
液约1ml共5份,别离周密加入必然量的葡萄糖标准品,制备供试品
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