β-烟酰胺单核苷酸 (NMN) 的测定核磁共振波谱法.pdfVIP

β-烟酰胺单核苷酸（NMN）的测定

核磁共振波谱法

1范围

本文件规定了β-烟酰胺单核苷酸（NMN）的测定方法——核磁共振波谱法。

本文件适用于β-烟酰胺单核苷酸（NMN）的定量检测，适用的产品类别包括NMN原料，及以NMN

为主要/标志性成分生产的片剂、粉剂、颗粒剂等。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

JY/T0578-2020超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱测试方法通则

JJF1448-2014超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪校准规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

NMN：nicotinamidemononucleotide，β-烟酰胺单核苷酸。

NMR：nuclearmagneticresonance，核磁共振。

5方法原理

化合物氢原子所处化学环境不同，其信号峰出峰位置和裂分情况会有所不同，在充分弛豫条件下，

1

信号峰的峰面积与氢原子数量成正比。选择合适的特征信号峰和内标物，使用核磁共振波谱仪采集H

NMR信号，采用外标法定量测定样品中NMN的含量。

6仪器设备

1

核磁共振波谱仪：氢（H）共振频率不低于400MHz；可控温，温度精度不低于±0.1℃。

核磁共振样品管：外径5mm，同心且均匀。

分析天平：感量为0.01mg。

涡旋振荡器。

低速离心机。

移液器：10µL～100µL，20µL～200µL，100µL～1000µL。

微孔滤膜：孔径0.22μm。

7试剂和材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯。

1

重水（DO）：氘代率不小于99.8%。

2

3-三甲基硅烷基-2,2,3,3-氘代丙酸钠（TSP-d，CAS号：24493-21-8）。

4

β-烟酰胺单核苷酸（NMN，CHNOP，CAS号：1094-61-7）标准品：纯度不小于98%，或国

111528

家有证标准物质。

TSP-d4溶液：4mmol/L，称取68.91mgTSP-d4至100mL容量瓶，用重水定容，混匀。

NMN标准储备液（100mmol/L）：称取33.42mgNMN标准品至1mL容量瓶，用TSP-d4溶液定

容，混匀，临用现配。

NMN系列标准工作液：准确吸取适量NMN标准储备液，用TSP-d4溶液逐级稀释，配制成0.2

mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L、10mmol/L、20mmol/L、50mmol/L、100mmol/L

NMN系列标准工作液，临用现配。可根据样品中NMN含量适当调整标准工作液及储备液浓度。

8检测步骤

样品前处理

产品样品：取20片（颗、粒）产品样品，充分研磨成粉末状（胶囊类样品需去掉胶囊壳），混匀，

均分成三份，分别为测试样品、复检样品和保存样品，装入样品瓶，密封并标记，室温储存。

原料样品：无需特殊处理，可直接称取，装入样品瓶，密封并标记，室温储存。

样品制备

准确称取处理好的样品10.00mg于2mL离心管，加入1000μLTSP-d溶液，涡旋混匀并成分溶解，