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教材基础练
知识点86重组DNA技术的基本工具知识点87基因工程的基本操作程序及应用教材实验12DNA的粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定知识点88蛋白质工程及生物技术的安全性和伦理问题长句训练7生物技术与工程中的目的、原因及操作分析
知识点86重组DNA技术的基本工具
教材知识萃取
1.基因工程的概念???转基因生物产品分子水平重组DNA技术
2.基因工程的基本工具
3.与DNA有关的几种酶的比较种类项目作用底物作用结果限制酶DNA分子切开磷酸二酯键,形成黏性末端或平末端DNA连接酶两个DNA分子片段通过形成磷酸二酯键,进而形成新的单链DNA分子DNA聚合酶DNA片段、脱氧核苷酸通过形成磷酸二酯键,进而形成新的单链DNA分子DNA酶断开磷酸二酯键,形成脱氧核苷酸解旋酶双链DNA分子断开碱基对间的氢键,形成单链DNA分子RNA聚合酶RNA片段、核糖核苷酸通过形成磷酸二酯键,进而形成单链RNA分子DNA分子
深度思考1.原核生物中存在限制酶的意义是什么?提示原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全,防止外来DNA的入侵。2.原核生物中限制酶为什么不切割自身的DNA?提示原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已被修饰等。
3.基因工程中的载体与细胞膜上的载体相同吗?提示不同。基因工程中的载体通常是DNA,主要是携带外源基因进入受体细胞并在受体细胞中进行自我复制,或整合到受体DNA上,随受体DNA进行同步复制;细胞膜上的载体一般为蛋白质,主要是运载要进入细胞的特定物质。4.天然质粒一般不能直接用作基因工程载体的原因是什么?提示只有具有能自我复制、有一个或多个限制酶切割位点、有标记基因及对受体细胞无害等特点的质粒才可以直接用作基因工程的载体。实际上天然质粒一般不完全具备上述条件,其往往需要进行人工改造后才能用于基因工程操作。
教材素材变式1.[链接人教版选必3P70从社会中来]我国华南农业大学科研人员利用农杆菌转化法将抗环斑病毒基因导入番木瓜,培育出转基因抗病番木瓜。下列叙述错误的是()B??
2.[链接人教版选必3P71图3-3]如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点(箭头表示相关酶的切割位点),如图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是()限制酶识别序列C?
?
??脱氧核糖核酸磷酸和脱氧核糖交替排列在外侧?
(2)将人的胰岛素基因导入质粒构建基因表达载体时,所需的酶是______________________________;基因表达载体应具备的基本条件有________________________________________________(答2点)。?能自我复制、具有标记基因、具有启动子和终止子等?
?标记基因用于鉴定目的基因(或重组质粒)是否导入受体细胞?
???
知识点87基因工程的基本操作程序及应用
教材知识萃取
1.基因工程的操作程序
?
2.利用PCR获取和扩增目的基因
PCR与体内DNA复制的异同类型PCR体内DNA复制时期人工控制,随时进行有丝分裂和减数分裂前的间期场所细胞外细胞内解旋方式解旋酶催化酶耐高温的DNA聚合酶解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶子链合成方式一条连续合成,另一条不连续合成结果扩增DNA片段或基因合成整个DNA分子相同点
深度思考1.构建基因表达载体时,为什么一般选用两种限制酶切割目的基因和载体?提示因为用不同的限制酶分别处理目的基因和载体时,可以使目的基因两侧和载体上各自具有两个不同的黏性末端,防止目的基因或载体发生自身环化。2.农杆菌转化法中的“转化”与肺炎链球菌转化实验中的“转化”的原理是否相同?提示相同,都是基因重组。
3.在构建质粒载体时,目的基因的序列中能否含有用到的限制酶的识别序列,为什么?提示不能,因为目的基因的序列中若含有用到的限制酶的识别序列,目的基因可能会被切断。??
5.复性时,引物与DNA模板的结合是随机的,但两条解开的DNA模板链结合的概率较低,其原因是什么?提示①模板链一般较长,比引物复杂得多,重新结合的概率低;②加入引物的量足够多,而模板链较少,故引物和模板链结合的机会远大于模板链间的。
教材素材变式变式1目的基因的筛选与获取1.[链接人教版选必3P77正文]随着科学技术的发展,获取目的基因的方法也越来越多,下列不属于获取目的基因的方法是()C??
变式2将目的基因导
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