鳞翅目昆虫细胞抗菌肽的诱导、筛选及抗菌活性的研究_彭蓉.pdfVIP

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第40卷第2期华中师范大学学报(自然科学版)Vol.40No.2

2006年6月JOURNALOFCENTRALCHINANORMALUNIVERSITY(Nat.Sci.)Ju.2006

文章编号：1000-1190(2006)02-0240-04

鳞翅目昆虫细胞抗菌肽的诱导、

筛选及抗菌活性的研究

12Δ11131∗

彭蓉,杨忠,刘凯于,姚汉超,杨红,崔艳芳,洪华珠

(1.华中师范大学生命科学学院,武汉430079；2.华东理工大学生物工程学院,上200237；

3.华中师范大学化学学院,武汉430079)

摘要：选取3种离体培养的鳞翅目昆虫细胞系,采用热灭活的大肠杆菌诱导的方法,诱导其产生

抗菌肽,并进行抗菌活性检测、诱导动力学研究及TricieSDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析.结

果筛选到1株诱导抗菌活性较高的昆虫细胞系粉纹夜蛾BTI-T-5B1细胞系,并发现该粉

纹夜蛾5B1细胞在诱导后16h产生了1个分子量大约为8000的抗菌肽,抗菌活性检测表明其对

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大肠杆菌(EscherichiacoliKD)、德氏卑沙门氏菌(

1231

Salmonelladerby)均有不同程度的抑制作用,其中特别是对革兰氏阴性菌大肠杆菌KD和

1231

德氏卑沙门氏菌有较强的抑菌活性.

关键词：抗菌肽；BTI-T-5B1细胞系；TricieSDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；抗菌活性

中图分类号：Q966文献标识码：A

昆虫抗菌肽是昆虫体液免疫的主要有效成分,的发展潜力.

是一类有生物活性的小分子多肽,它们在昆虫的脂体外培养的免疫应答细胞的增殖为深入了解

肪体和某些血细胞中迅速产生并大量合成,并分泌高等哺乳动物的免疫反应打下一定的基础,相比之

到血淋巴参与虫体对入侵物的免疫反应,抗菌肽的下利用体外培养的细胞来研究昆虫的免疫才刚刚

诱导、表达及其协同作用于外源微生物,构成昆虫开始.近年来,国外许多科学家已经开始探讨利用

[1-3]

先天性防御系统中极为重要的环节.自从20世昆虫离体细胞系来研究昆虫免疫的可能性及适应

纪80年代初,瑞典Boma等人首次从人工诱导的性.到目前为止,已成功地从体外培养的昆虫细胞

天蚕免疫血淋巴中分离了第一种抗菌肽-天蚕素系中诱导、分离和鉴定了多种抗菌活性物质,从而

[4,5]证明了这种体外研究系统对阐明昆虫免疫的生物

(Cecropi)以来,人们从许多昆虫中相继分离

纯化出多种不同种类的抗菌肽,并确定了其氨基酸和分子机制具有可能性和重要意义[12-15].本文尝试

一级结构,抗菌肽逐渐成为昆虫免疫学及分子生物从这一崭新的角度来进行昆虫抗菌肽的研究.

学的研究热点[6-11].昆虫抗菌具有分子量小、热稳

1料和方法

定性强、水溶性好、无免疫原性、生物活性广泛等特

点,在医药卫