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（ELISA）检测质量控制及质量改进几点方法

一、ELISA室内质量控制程序

临床检验的检测结果，每次或每天之间不可能没有误差。决定允许的误差范围，

以临床上不造成误诊与漏诊为准，通过以下步骤来确定质控范围。

1、最佳条件下的测定误差

最佳条件下已知值质控血清变异（optimalconditionsvariance,简称OCV）

的测定：在本实验室最佳条件下（包括操作者、试剂、仪器等）检测质控血清

20-30次，测得结果计算，求出该组数据的均值和标准差（SD）表示该实验室

的最佳工作质量。

现举例说明HBsAgELISA法检测时OCV的测定。使用的质控制血清为临界

血清，HBsAg浓度为5ng/ml。在该实验室中选择素质最好、操作最熟练的技

术员进行认真地专门测定，选用最佳的试剂盒，检测之前，将恒箱、加样器等

认真校正、调校正、调试，使用新的加样吸头等，即在最佳、最理想的条件下

进行检测。除质控血清外同时测定阴性对照品和阳性对照品。并作双份测定，

得出2个吸光值（A值），求出X。连续作20次，求出20个X，即X1……

X20。从这20个数据中，求出OCV的X和SD。

2、已知值的血清在常规检验条件下的误差

常规条件下已知值质控血清变异（routineconditionsvariance-knownvalue,

简称RCVK）的测定：做常规检验的技术人员，在常规检验的条件下，将质控

血清放在常规检测样本中，进行20次检验，结果计算同OCV法。一般认为

RCV的SD在OCV的SD两倍范围内可以接受。若太大应该查找原因，使其

向OCV的SD值靠近。在改进实验室条件后（例如较正加样器，纠正洗板操

作，调正温育温度等），重新进行RCVK的测定。如果RCVK的SD值更小，

说明OCV不是最佳条件下测定的，应重新再测OCV。常规条件下，RCVK肯

定要比OCV大。通过质控控制各项条件，使RCVK的数据尽可能接近OCV

值。RCVK的数据反映该实验室日常工作的质量，用于作质控图，对室内检验

的结果进行控制，每日检验的结果，报告能否发出。

3、未知值的血清在常规检验条件下的误差

常规条件下，未知值质控血清变异(routineconditionsvariancl-unknown

value简称RCVU)的测定：有时为了避免主观性，再作RCVU测定。测定步

骤同RCVK，但检测的操作者不知质控血清的定值，或在操作者不知哪份是质

控血汪清的条件下进行常规检验，以排除操作者的主观性。在此不再举例说

明。

4、临床应用的要求

对任何一个试验都应确定一个允许的误差范围，前题是满足临床要求。如允许

误差定得过小，在临床上不存在任何意义，但为了符合该规定却要花费很大人

力、物力和时间。相反，如果将允许误差定得过大，将使监测系统察觉不到临

床上要求检出的误差，失去质控的意义。

二、ELISA室间质量评价

室间质量评价（externalqualityassessment,简称EQA）简称室间质评，是

由质控中心采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果，并发

现室内质控不易发现的不准确性，了解各实验室之间结果的差异，并帮助校正，

使具有可比性。各实验室试验结果报到质控中心，经过统计分析，得出相互比

较的结果。这种评价不能控制各实验室每天发出的检验报告，而是一种回顾性

评价。室内质控主要监测试验结果的精密度，而室间质评主要控制试验结果的

准确度，不能互相替代。参与质评的实验室应先做好室内质控。

1、室间质评的方法

（1）发质控物进行调查

这是国内外室间质评的常用形式。部临检中心对乙肝标志物ELISA检验的室间

质评采用定期发放质控物至各实验室，各实验室在规定的日期进行检验，并将

检验结果报至部临检中心。部临检中心经统计分析，将评价结果寄回各实验室。

通过评价，各实验室了解本室工作质量，发现差距，并设法改进，以不断提高

检验质量。这种评价方式有一定缺点，即各实验室常对质控物特殊对待，在检

验时选用特殊试剂盒，选派特别的技术员进行检验，有的实验室互相和对结果

并作修改。这就使EQ