专题一-微生物的实验室培养.ppt

液体培养基与固体培养基无机C源：CO2、碳酸盐，只能被自养微生物利用有机C源：主要是各种糖类分子态氮：固氮微生物以分子氮为唯一氮源无机态氮：硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用有机态氮：蛋白质及其降解产物实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。**专题2:微生物的培养与应用微生物包括哪五类：病毒细菌放线菌真菌原生动物特点：结构都相当简单,个体多数十分微小。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构。原核生物界原生生物界真菌界病毒界一、基础知识：（一）培养基培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定等。（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。1.培养基的类型半固体培养基：无动力有动力(弥散)(是否运动)天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。合成培养基:天然培养基：2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)3.培养基的基本成分：水、碳源、和氮源、无机盐。培养基还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质，例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)等的要求。碳源：Cncnc-micro指提供碳元素的物质氮源：Cncnc-micro指提供氮元素的物质（二）无菌技术1.无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。（１）消毒定义：利用较为温和的化学或物理方法，杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。2.消毒与灭菌的概念及两者的区别（2）灭菌的定义：是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括孢子和芽孢，而达到完全无菌之过程。

1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源4、紫外线消毒法(1)消毒的方法：3.常用的消毒与灭菌的方法1、灼烧灭菌法接种环、接种针、试管口2、干热灭菌法：160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌法：100kPa、121℃下维持15-30min.对培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法(2)灭菌的方法：2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。三、实验操作（一.）制备牛肉膏蛋白胨培养基1．计算2．称量3．溶化4.灭菌将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170℃下灭菌2h。5．倒平板:待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本P17）6．无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。无杂菌污染才可用来接种1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？答：可以用手触摸，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答：将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；又可以避免培养基中的水分过快地挥发。答：空气中的微生物可能在皿盖与