大鼠急性胰腺炎血清中IL6浓度的动态变化.doc

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大鼠急性胰腺炎血清中IL6浓度的动态变化.doc

大鼠急性胰腺炎血清中IL6浓度的动态变化大鼠急性胰腺炎血清中IL6浓度的动态变化【摘要】目的:

制作大鼠急性胰腺炎模型,探讨AP发病过程中血清IL-6与胰腺病理变化及两者之间的关咏系。

方法:

SD大鼠随机分为2组,假手肩术组和AP组,每组30只,用十二指肠邝闭襻法制作大鼠的AP模型,各组于造模ㄇ后6、12、24h分批处死大鼠,用E朔LISA法检测血清IL6,同时取胰突腺组织进行病理评分。

结果:

(1)AP憬组血清IL6水平明显高于同时间点假垆手术组,并随时点延长而升高,P【关键赏词】胰腺炎急性坏死性白细胞介素6血玫清学病理状态解剖学急性胰腺炎(ac松utepancreatitis,AP访)是临床内、外科常见的急症之一。

病理绫上分为水肿型和出血坏死型,临床上又分为轻型AP和重症急性胰腺炎(seve楞reacutepancretitis唯,SAP),大约20%的轻型急性胰腺缲炎患者会发展成为重症急性胰腺炎,而S勇AP往往合并严重的并发症及较高的死亡ɡ率[1]。

AP的发病机制至今尚未完全明了,研究认为,AP的发生发展与胰酶罂的异常激活引起胰腺细胞的自身消化庐外,还与细胞因子的过度释放,胰腺微循环障碍,胰腺腺泡细胞坏死及凋亡等诸多饭机制有关[2,3]。

细胞因子等炎症介羡质启动全身炎症反应,被认为是SAP从瀹局部病变迅速发展为全身性损害的重要因嗜素,越来越多的证据表明,细胞因子在A瓮P的发病过程中发挥着重要的作用[4]。

XX年5月~XX年10月,研究大鼠垃AP不同时期外周血中IL6浓度变化及相应的胰腺病理改变,对IL6与A遽P严重程度的相关性进行初步探讨,进一礞步阐明AP的发病机制。

1材料与方ぉ法材料动物及分组健康成年SD大鼠60只,雌雄不限,体重为(250斥30)g,标准棒状饲料喂养,大鼠随棹机分为2组,假手术组和AP组,每组3讽0只。

试剂及仪器EiLSA试剂盒戡(由天津灏阳生物有限公司提供),全自玩动酶标仪(Metertech960),显微镜(OLYMPUS100)。

实验方法动物模型的制备采用改良辑十二指肠闭襻法制作AP模型[5],该模型与人体胆汁返流性AP相类似,手术咳造成十二指肠腔内压力增高,使胆汁返流蛘入胰管诱发AP。

假手术组大鼠开腹后,燕胃窦部做小切口,并缝合关闭腹腔。

麻醉拴清醒后大鼠可以自由饮水。

观察指标与异检测法两组大鼠分别于术后6、12、痞24h分批处死,每批10只,经颈静脉疑取血ml,1500r/min离心5~犏10min,取分离血清-70℃保存备谱用。

用酶联免疫吸附法检测血清中IL嘻6浓度,检测方法严格按照说明书进行。

胰腺组织的病理检查及评分各组在规蓖定时间内处死大鼠,肉眼观察胰腺组织的噗大体病理改变。

取胰腺组织用10%甲醛驹溶液固定,石腊包埋、切片及HE染色,铮在光镜下观察并盲法病理评分,按Kusske等[6]标准进行病理学分级,分犯为水肿、出血、坏死及中性粒细胞浸润4"项,程度逐项按其正常至最重,共分为5丿级,得分越高,胰腺组织的病理改变越重菏。

分级标准见表1。

贵阳医学院学报3绢4卷2期田宇等表1胰腺组织病理菪评分标准评分水肿出血坏死炎性细胞浸厍润0无无无无1小叶间灶性水肿实质出血灰面积50%形成脓肿统计学处理以S溽PSS软件包进行统计处理,用方差分析腮及SNK(StaeleatNewmǖanKewts)检验,结果表示为均芤数标准差,IL6与病理评分的相关镣性研究用peason分析,P<有统计爰学差异。

2结果血清IL6A联P组于造模后6h开始,血清IL6含梯量即升高,并随术后时间的延长逐渐升高,各时间点的IL6值均较假手术组明瞍显升高,差异显著;A

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