大鼠小肠移植模型中移植肠的选择_0.doc

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大鼠小肠移植模型中移植肠的选择

大鼠小肠移植模型中移植肠的选择作者：

季刚牛卫博董光龙王为忠【摘要】目的：

比较大鼠异位小肠移植模型中不同节段移植肠的病理学变化及移植肠存活率.方法:将近交系Wistar大鼠320只随机配对分为A，B，C，D4组.A组为对照组（n=80），行虚拟手术；B组（n=80）行异位全小肠移植；C组（n=80）行异位节段性小肠移植，移植肠部位取中、远段小肠，长度15～50cm不等；D组（n=80）亦行异位节段性小肠移植，移植肠部位取近段小肠，长度15～50cm不等；各组术后常规补液，给予抗生素.每日观察移植肠造瘘口颜色及分泌物.并于术后1，7，14，30d于移植肠近端造口内注入麦芽糖溶液，各组随机抽取20只受体于术后7，14，30d统一自颈外静脉置管处采血1mL，测量注入麦芽糖前后血糖值并换算出血糖吸收值.移植鼠濒临死亡时取材，行组织病理学检测.结果：

B组受体的病理学变化程度较C，D组明显，大鼠的存活率亦较低.B，C，D各组血糖吸收值变化无统计学差异.结论：

在大鼠小肠移植模型的移植肠的选择中，节段性较全小肠移植效果好；节段性移植肠的选择以取距屈氏韧带5cm、长度约15～20cm移植肠为宜.【关键词】小肠/移植；大鼠；移植肠0引言大鼠小肠移植模型的建立至今已有30年的历史［1］，在此期间已有不少的创新和发展，但是由于技术复杂和死亡率高，仍然严重妨碍了这种模型的广泛应用.我们在长期的小肠移植模型建立的实验中发现，不同节段移植肠的选择是影响模型存活率的重要因素.我们采用不受移植免疫因素影响的近交品系Wistar大鼠分别作为供体和受体施行异位小肠移植，以期提高存活率.1材料和方法1.1材料成年健康雄性近交系Wistar大鼠320只，体质量280～320g(第四军医大学实验动物中心)，移植配对时体质量相近.戊巴比妥钠生理盐水，活力碘，福尔马林，乳酸林格液（第四军医大学试剂中心）；麦芽糖溶液（上海南翔试剂有限公司），光学显微镜（上海光学仪器厂，L3142206型）.1.2方法1.2.1移植模型制作1.2.1.1动物分组及麻醉将近交系Wistar大鼠320只随机配对分为A，B，C，D4组.A组为对照组（n=80）行虚拟手术；B组（n=80）行异位全小肠移植；C组（n=80）行异位节段性小肠移植，移植肠部位取中、远段小肠，长度15～50cm不等；D组（n=80）亦行异位节段性小肠移植，移植肠部位取近段小肠，长度15～50cm不等.供、受体均在代谢笼内禁食10～12h，自由饮用16万U/L庆大霉素+50g/L葡萄糖氯化钠溶液.动物麻醉按10L/g腹腔内注射10g/L氯胺酮，可维持1～2h，若术中动物苏醒，可追加原始剂量的1/4.1.2.1.2供体手术沿腹部中线纵形切口入腹后,首先行全结肠切除术.①B组：

分别在距Treitz韧带1cm和距回盲部2cm处切断空肠及回肠；②C组：

取中、远段小肠，长度15～50cm不等；③D组：

于距屈氏韧带5cm为近端，取小肠约20cm.两端均切断、结扎,游离肠系膜上静脉、门静脉至肝门处，尽量剥净周围胰腺组织，游离带肠系膜动脉的一段腹主动脉,阻断已分离的腹主动脉近心端,经肾下腹主动脉行小肠原位灌洗，灌洗液为4℃肝素化乳酸林格液约5～10mL,于40cm高度灌洗移植肠段至肠管颜色苍白，同时腹腔内充满冰盐水降温.灌洗的同时于肝门处离断门静脉,将5F内径cuff管套入门静脉，翻转门静脉使其内膜向外翻于套管上，0/6号丝线结扎固定将移植肠取下放入4℃乳酸林格液中保存.1.2.1.3受体手术首先行上腔静脉置管，参照Wallander等［2］的方法.取左颈前外侧锁骨上纵行皮肤切口约1cm，显露颈外静脉，向心插入1～1.5cm达上腔静脉固定.