细胞通透性实验报告.pdfVIP

一、实验目的

1.了解溶血现象及细胞通透性的一般规律；

2.观察细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度;

二、实验原理

细胞膜是一种半透膜，对物质的通透具有选择性，使细胞具有一个相对稳定的内

环境。将红细胞放在低渗溶液中，水分子会大量渗到细胞内，使细胞胀破：

血红蛋白释放到介质中，发生溶血。将红细胞放入含有不同溶质的溶液中，由丁细胞

膜对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的则不能，渗入的溶质能提高红细胞

的渗透压，所以促使水分进入细胞。由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶

（

液，这种现象称为溶血hemolysis）。随着水分不断进入，红细胞最终破裂并引起溶

血。因而发生溶血现象所需的时间长短可以作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。

因此，本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料，将其放人不同的介质

溶液中，观察红细胞的变化。

二、实验用品

1.实验材料

鸡血（事先取好，加入Alsever液，混匀后制悬液，4C保存）；

2.实验试剂

0.85%勺氯化钠溶液（等渗溶液）；

0.0085%的氯化钠溶液（低渗溶液）

0.8mol/L的甲醇、0.8mol/L的丙三醇、6%的葡萄糖溶液、2%的TritonX-100

溶液（高渗溶液）；

3.实验器材

试管（此处用的是刻度离心管）六支、离心机、滴管、载玻片、盖玻片、

显微镜等

四、实验步骤

1.取血

吸取预先处理好的鸡血溶液6mL,加入4mL的等渗0.85%的氯化钠溶液,

混匀后放入离心机，1200rpm离心5min；

2.制细胞悬:液

用滴管吸取上活液，加入与沉淀量相等的等渗NaCl溶液，混匀制成悬液。

（如果沉淀量少丁1.2ml,则补充鸡血）

3.溶血现象观察

在离心管之中分别加入0.85%的氯化钠溶液、0.0085%的氯化钠溶液、

0.8mol/L的甲醇、0.8mol/L的丙三醇、6%的葡萄糖溶液、2%的TritonX-100

溶液3mL,滴入两滴细胞悬液，立即混匀并计时，溶血现象发生后，记录溶血时

间，并制片观察溶血情况：

0.0085%的氯化钠溶液、0.8mol/L的甲醇、2%的TritonX-100溶液（高渗溶

液）反应非常迅速，因此需立即观察；

0.8mol/L的丙三醇、6%的葡萄糖溶液反应程度不剧烈，所以，每间隔10分钟

观察记录溶血情况，观察1h。

注意：

6%的葡萄糖溶液有强烈的诱导细胞融合的作用，因此，必须严格混匀之后进

行观察。

五、实验结果判断

）

（一判断指标

（1）不溶血:液体分二层，上层浅黄色透明，下层红色不透明。镜检红细胞完

好。

（2）不完全溶血：溶液混浊，上层变成红色，镜检有部分红细胞有缺口或破

裂。

（3）完全溶血：液体变红而且透明，镜检发现细胞全部成碎片。

（二）记录溶血时间：

试剂类型是否溶血时间结果分析

0.85%NaCl+W释鸡血否等渗溶液中不会发生破裂，作为

对照。

0.0085%NaCl+W释鸡血是30s低渗溶液，细胞吸水涨破。

0.8mol/L甲醇+稀释鸡血是8s局渗溶液，细胞通透，屋大，导