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微生物在变压器油中的生长研究

饶春;何昱昊;田倩;何泽超

【摘要】取土壤样通过富集、分离、纯化等方法,得到能以变压器油为唯一碳源的好氧细菌和厌氧细菌,说明自然环境中的确存在能利用变压器油为碳源生长繁殖的细菌.在不同条件下,以变压器油为唯一碳源进行好氧和厌氧培养,当体系在无游离水条件下、温度≥50℃或pH值≤5.0时,微生物均不能生长繁殖,说明在变压器油工作状态下,微生物不能在其中生长繁殖.从运行中的介损值偏高的变压器中取油样,未检测出微生物.

【期刊名称】《化学与生物工程》

【年(卷),期】2014(031)002

【总页数】4页(P48-51)

【关键词】变压器油;好氧细菌;厌氧细菌;生长条件

【作者】饶春;何昱昊;田倩;何泽超

【作者单位】四川大学化学工程学院,四川成都610065;四川大学电气信息学院,四川成都610065;四川大学化学工程学院,四川成都610065;四川大学化学工程学院,四川成都610065

【正文语种】中文

【中图分类】Q939.112

变压器油是石油经过分馏得到的产物之一，具有绝缘、散热、消弧作用。变压器油的主要成分是烷烃、环烷烃和芳香族化合物，其中碳氢元素质量分数为95%～99%[1]。在适宜条件下，这些烃类可作为碳源被微生物利用[2]。变压器油的性能对变压器的安全运行具有重大影响。在变压器油使用过程中存在介损值不明原因偏高的现象，现有的研究结论尚不一致。梅子青等[3]研究认为变压器油的细菌种类繁多，其对变压器油的影响较为明显。姬晓川等[4]研究发现存在以变压器油为唯一碳源的微生物，正常运行的变压器内部微生物无法生长繁殖，不会对油绝缘产生影响。韦强等[5]研究认为微生物在洁净的油中难以生长繁殖，不会对油的性能产生大的影响，只有在杂质、水较多的油中且温度适宜时才能大量生长，从而影响到油的质量。

作者从土壤中取样，分离纯化出多种能以变压器油为唯一碳源的好氧细菌和厌氧细菌，对细菌的生长条件进行研究，对比变压器油的运行条件并检测介损值偏高的变压器油，验证细菌在变压器油中生长繁殖的可能性。

1实验

1.1材料、培养基与仪器

变压器油样品分别为新油及从四川大英县变电站取样。

液体培养基[6]：牛肉膏5g·L-1，蛋白胨10g·L-1，氯化钠5g·L-1，pH值7.2左右。

固体培养基：在液体培养基中加入琼脂13g·L-1。

唯一碳源液体培养基：硫酸铵2g·L-1，柠檬酸三钠1g·L-1，硫酸镁0.2g·L-1，磷酸二氢钾6g·L-1，磷酸氢二钾4g·L-1，变压器油10mL，pH值7.0。

唯一碳源固体培养基：在唯一碳源液体培养基中加入琼脂12g·L-1。

SC-50X型电热恒温培养箱、DG-0.2型电热恒温培养箱，四川吉峰农业机电设备厂；SW-CJ-IO型单人净化工作台，苏州净化设备有限公司；YXQ.SG46.280-B型手提式压力蒸汽消毒器，成都胜利医用设备厂；XS-18型显微镜，江南光电(集团)股份有限公司；E331型pH计，上海康仪仪器有限公司。

1.2方法

1.2.1微生物的富集、分离及纯化

取土壤样，接种到液体培养基中于37℃进行好氧及厌氧富集培养。再转移至唯一碳源培养基中于37℃好氧及厌氧培养数天(视菌落生长情况而定)。挑取富集培养物，采用平板划线法接种到培养基中，好氧菌倒置于培养箱中培养，厌氧菌于厌氧罐中培养。挑取特征明显的菌落，反复在平板上进行分离纯化，直至培养后的菌落具有单一特征，质地均匀。挑取分离纯化后的菌种接种到斜面培养基上培养，置冰箱保存。

1.2.2菌属的鉴定

在细菌菌落生长一段时间后，进行外观形态拍照留存及革兰氏染色后镜检。按照《伯杰氏细菌鉴定手册》[7]对纯化的细菌进行鉴定[8]，将活化的细菌菌株转接到合适的培养基上，进行生理生化实验，并记录实验现象。

1.2.3生长条件测定

pH值及温度实验：将富集培养的好氧细菌和厌氧细菌接种到生理盐水中，稀释摇匀，然后将菌液接种到不同pH值的唯一碳源培养基中，在不同温度下分别好氧和厌氧培养3d，再取培养液梯度稀释至固体培养基上进行平板计数，计算细菌浓度。

水分含量实验：将富集培养的好氧细菌和厌氧细菌先接种到生理盐水中，稀释摇匀，然后将菌液注入已灭菌并经硅胶吸水的变压器油中，加入生理盐水使初始pH值为7.0，油中水分含量不同，分别在40℃下好氧和厌氧培养3d，进行梯度稀释法计数。

1.2.4验证实验

将固体培养基和唯一碳源培养基(不加碳源)等量分装至锥形瓶中，待其冷却后，在无菌条件下，分别取6mL样品加入各锥形瓶中，用棉塞塞住瓶口，在30℃的恒温培养箱中好氧和厌氧培养数天，每日观察。

2结果与讨论

实验得到能以变压器油为唯一碳源生长的好氧细菌6株、厌氧细菌4株，对其进行初