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眼科角膜共聚焦显微镜检查操作技术
(CMTF)
角膜共聚焦显微镜全称为扫描裂隙角膜共聚焦显微
镜,简称共焦显微镜,是近年来发展起来的一种活体显微检查技
术。
1955年Minsky发明了第一台用于研究脑神经网络的共焦显
微镜,Cavanagh等于1986年将其应用于眼科的动物实验,又于
1989年首次用于活体人眼的观察。此后,共焦显微镜在角膜病的
基础研究和临床工作中得到广泛应用,使角膜病的研究和诊断水
平向前推进了一大步。
一、基本原理
角膜共聚焦显微镜的原理是利用共姬焦点技术,运用光扫描
对活体组织进行三维空间的显示和实时的观察,其获得图像的扫
300μm×400μm,5um,IOOoXY
描范围为厚约放大倍数倍,、、
Z轴由三轴机器杆控制,移动范围可精确到小于IUn1。与普通的
光学显微镜相比,它具有高分辨率和图像高对比度的特点,能够在
细胞水平对活体角膜进行无创伤的动态观察。临床主要有两种类
TandenISCanningConfoscan
型:共焦显微镜和裂隙扫描型共焦
显微镜。
目前共焦显微镜已由录像系统转化为数码摄像系统,使图像
更为清晰、完整,图片摄取速度更快捷,如Confoscan2.0共焦显
微镜。近来,激光角膜共焦显微镜也已用于临床,其图像清晰、分
1um
辨率高至、可对角膜病变和角膜缘疾病进行多层次立体及连
(HRTII/RCM)
续动态观察。我科首次应用激光共焦显微镜对正常
人活体角膜缘和角膜中央组织结构进行了观察,获得了传统光学
共焦显微镜无法获得的图像和效果,填补了活体观察角膜缘的空
白。
共焦显微镜由三大部分组成:①主机:由一个一维的扫描裂
隙装置和一个与图像光路相一致的物体聚集盘组成,在一维的光
切面上做三维的点状分层扫描。②光学传输系统:把连续、同步的
光扫描信号传到计算机屏幕和录像机磁带上。③计算机分析系统:
对记录在录像带上的图像进行分析、处理得到较清晰的图片资料。
对角膜的各层细胞数、大小、面积进行统计和数据分析。
二、临床意义
(1)快速无创伤地诊断角膜感染、营养不良、变性等角膜疾
病。
(2)观察屈光性角膜手术、角膜缘和角膜移植术后角膜各层
细胞和神经纤维等组织结构的变化。
(3)观察泪液膜和角膜各层细胞的变化及角膜缘干细胞是否
缺乏。
(4)随访配戴不同接触镜后的角膜结构状态的改变。
(5)观察不同眼药水在角膜各层组织中的渗透。
(6)动态观察新生血管在角膜内的增生变化过程、角
膜上皮和内皮损伤的修复。
(7)储存受检者的角膜资料,利于将来的对照观察和研究。
三、检查方法
(1)先行角膜表面麻醉,滴0.5%丁卡因1~2次,嘱睁大眼,
对配合欠佳者可行开睑器开睑。
(2)摄像镜头用75%乙醇浸泡、擦拭消毒,对可疑感染性角
膜病变患者要严格消毒,避免交叉感染。
(3)下颌置于托架上,额部顶紧托架上方的头带,保持头与
显微镜的镜头相垂直。
(4)镜头上覆以适量的黏弹剂做介质(过多易流失,过少影响
图像清晰)。
(5)对准中心区或有选择地对病变处进行扫描。至少测2个
点,以提高阳性率。
(6)扫描图像通过计算机显示屏幕快速显示,并被记录在录
像机或计算机系统(整个过程约1分钟)。
(7)结果处
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