长沙市无偿献血者血液样本酶联免疫检测联合核酸检测HBV的结果分析.docxVIP

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长沙市无偿献血者血液样本酶联免疫检测联合核酸检测HBV的结果分析

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白颖张钢郭咚蒋义

[摘要]目的分析2017年度长沙血液中心所有无偿献血者的血液样本HBV项目的酶联免疫检测联合核酸检测筛查结果。方法对该站2017年1—12月采集的159228份血液的相应标本，先采用2种不同厂家试剂进行2遍包括HBsAg等4项感染性标志物的酶联免疫检测以及转氨酶的血清学检测，后对所有血清学检测结果合格的进行包括HBVDNA等3项经血传播病毒的核酸检测。结果在159228份献血者样本中，共3552份样本血清学检测项目不合格，其中1259份HBsAg的结果为不合格。对血清学检测合格的155676份样本进行核酸检测后，71份为HBVDNA阳性。结论对无偿献血者的样本采取酶联免疫检测和核酸检测相结合的联合检测模式，使HBV的检出率有明显提高，有效避免因隐匿性乙肝、窗口期等因素造成的漏檢，降低输血传播乙肝风险，提高血站的血液质量安全。

[关键词]酶联免疫检测；核酸检测；HBsAg；HBVDNA

[]R446.11[]A[]1672-5654（2018）07（a）-0171-02

血液安全是血站永恒的质量主题，如何降低输血传播疾病风险是血站人不断追求和持续改进的目标。我国采供血系统血液筛查的传统检测方法为酶联免疫吸附试验，虽然方法灵敏度和特异性不断提升，但是由于窗口期感染，免疫静默，病毒变异，隐匿性感染等原因，检测后依然存在较高的残余风险[1]。乙肝在我国具有高流行率，有研究表明[2]，1～59岁人群中约5.84%为HBV携带者。无偿献血者标本通过酶免试验筛查血液HBsAg后，血液中HBV仍然存在较大的漏检风险。按照国家要求，近年来该中心实施在2遍酶免试验的基础上，全面增加一遍核酸检测的检测模式。现对该中心献血者的HBsAg酶免检测联合HBVDNA核酸2017年1—12月检测的筛查结果进行比较分析。

1资料与方法

1.1一般资料

选取该中心采集的159228名无偿献血者的血液标本作为研究材料。所有献血者在献血前经过ALT干式生化仪检测和HBsAg、TP快速金标法检测合格，体检符合《献血者健康检查要求》（GB18467-2011）。每位献血者留取2管含EDTA-K2抗凝剂的血液标本，各5mL，一管用于血清学检测，另一管还包含分离胶、无菌、无RNA酶的用于核酸检测。

1.2试剂与仪器

1.2.1试剂酶免检测试剂：HBsAg；核酸检测试剂：HBV、HCV、HIV（1+2型）联合试剂。所有试剂均为经过国家批批检合格产品，且在有效期内使用。

1.2.2仪器酶免检测设备：EVO全自动加样仪（奥地利帝肯）、STAR全自动加样仪、FAME24/20和FAME24/30全自动酶联免疫后处理系统；核酸检测设备：德国罗氏CobasS201核酸检测系统、上海科华核酸检测系统，二者互为备用系统。所有设备均在校验合格期内使用。

1.3方法

1.3.1血清学检测所有标本由不同工作人员采用两种不同厂家试剂严格按照试剂说明书要求进行2次HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的酶免检测，以及不同厂家试剂的2遍ALT项目的速率法检测。

其中ALT50U/L判为不合格；HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP酶免检测S/CO值≥1.0判为有反应性，进口试剂0.7≤S/CO值≤1.0、国产试剂0.5≤S/CO值≤1.0判为灰区。2种试剂阳性/灰区，判为不合格；一种试剂阴性，另一种试剂阳性/灰区，采取双孔复查，复查结果任意一孔为阳性/灰区即判为不合格。

1.3.2核酸检测对血清学检测结果合格的标本采用一种核酸试剂进行HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA（1+2型）的核酸检测。罗氏检测系统为6人份（167uL/份）混样成1份（1mL）汇集池（pool），科华核酸检测系统为8人份（180μL/份）混样成1份（1.44mL）汇集池（pool），汇集后由该核酸检测系统的相应仪器进行核酸提取和荧光-PCR试验。每批试验均设置试剂盒自带的阴性质控、阳性质控、外部弱阳性质控，每个pool均含内对照（IC）。

汇集孔检测为阴性，则此汇集池（pool）中所有的标本合格；汇集池（pool）检测为阳性，则需要对此汇集池（pool）中的所有标本进行拆分试验，拆分试验相应标本阳性即判为不合格，阴性即判为合格。

2结果

2.1酶联免疫检测结果

该站2017年1—12月共采集159228份献血者的血液样本，经过酶联免疫检测，共1259份为HBsAg反应性（0.79%），其中HBsAg双试剂反应性数为510份，HBsAg单试剂反应性数为749份。酶免检测结果见表1。

2.2核酸检测结果