皖西学院 生物工程专业 大三蛋白质与酶工程复习题及答案.pdfVIP

蛋白质与酶工程课程复习题

一．名词解释：

1.蛋白质工程概念:通过基因工程技术或化学修饰技术改造现有蛋白或组建新型蛋

白的现代生物技术、

2.蛋白质的一级结构；蛋白质多链中氨基酸残基的排列顺序

3.蛋白质的二级结构：指肽链主链不同区段通过自身的相互作用，形成氢键，沿某

一主轴盘旋折叠而形成的局部空间结构，是蛋白质结构的构象单元

4结构域:对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个或两个以上相对独立的

三维实体缔合而成三级结构，这种相对独立的三维实体称结构域。现在结构域的概

念有三种不同而又相互联系的涵义:即独立的结构单位、独立的功能单位和独立的折

叠单位。

5.β－折叠:是蛋白质中的常见的二级结构，是由伸展的多肽链组成的。

6.α－螺旋:是蛋白质分子的一种基本结构

7.超二级结构:在蛋白质分子中，特别是球状蛋白质中，由若干相邻的二级结构单元

（即α—螺旋、β—折叠片和β—转角等）彼此相互作用组合在一起，，形成有规则、

在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件单元，称超二级结构。

8.三级结构是指球状蛋白质的多肽键在二级结构的基础上，通过侧链基团的相互作

用进一步卷曲折叠，借助次级键维系使β－折叠α－螺旋和无规则卷曲等二级结构

相互配置而形成特定的构象。

9四级结构指由相同或不同的称作亚基（subunit）的亚单位按照一定排布方式缔合

而成的蛋白质结构，维持四级结构稳定的作用力是疏水键、离子键、氢键、范得华

力。

10蛋白质折叠:。蛋白质可凭借相互作用在细胞环境（特定的酸碱度、温度等）下

自己组装自己

11蛋白质变性:是指蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改

变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，这种现象称为蛋白质变性。

12蛋白质复性:、

13回拆:所连接的肽链发生180°的反相弯曲

14第二遗传密码：氨基酸顺序与蛋白质三维结构之间存在的对应关系

15分子伴侣:是一类相互之间有关系的蛋白，它们的功能是帮助其他含多肽结构的

物质在体内进行非共价健的组装和卸装，但不是这些结构在发挥其正常生物学功能

的永久组成成分、

蛋白质的化学修饰:凡通过活性基团的引入或除去，而使蛋白质一级结构发生改变的

过程、

16定点突变：是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法对已知的目的基因DNA片段

进行碱基的添加、删除、点突变等，从而改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构。

17重叠延伸PCR技术：采用具有末端的引物，使PCR形成产物形成了重叠链，从而

在随后的扩增反应中，通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来

18报告基因:是指一组编码易被检测的蛋白质或酶的基因，将其与目的基因融合表

达后，可通过报告基因产物的表达来“报告”目的基因的表达调控。、

19模拟酶:就是利用有机化学的方法合成一些比酶简单的非蛋白质分子，可以模拟

酶对底物的络合和催化过程，既可达到酶催化的高效性，又可以克服酶的不稳定性、

20生物传感器—将生物体的成份（酶、抗原、抗体、DNA、激素）或生物体本身（细

胞、细胞器、组织）固定化在一器件上作为敏感元件的传感器。

21分子印迹：是制备对某一化合物具有选择性的聚合物的过程，这个化合物叫印迹

分子。

22微水介质体系

23酶分子的化学修饰：应用化学方法，通过主链的“切割”、“剪接”或侧链基团的

“化学修饰”对酶蛋白进行分子改造，改变其理化性质及活性的技术。

24HPLC:高压高速高效高灵敏度应用范围广高效液相色谱仪可分为“高压输液

泵”、“色谱柱”、“进样器”、“检测器”、“馏分收集器”以及“数据获取与

处理系统”等部分。、

25ATPE:[1]有端氨基聚氧化丙烯醚和端氨基聚氧化乙烯醚等，又称聚醚多胺、聚醚

胺(PEA)，简称ATPE，分子结构中含有醚键，属柔性固化剂。

二．简答题：

1．简述蛋白质工程的一般程序

筛选纯化需改造的目的蛋白→研究其特性常数等→制备结晶，分析研究蛋白质结构

与功能→结合生物信息学对蛋白质改造、分析→预测蛋白质空间结构，确定结构与

功能的关系，找出可修饰的位点和途径→设计核酸引物或探针，并从cDNA文库或基

因文库中获取编码该蛋白质的基因序列→改造编码蛋白质的基因序列，并在不同的

表达系统中表达→分离纯化表达产物，对表达产物的结构和功能进行检测

2.常见的融合蛋白标签（精氨酸标签，多聚组氨酸标签，FLAG标签，荧光蛋白标签）

和报告分子（β-半乳糖苷酶基因、胭脂碱合成酶基因