灭菌操作规程.pdfVIP

共享知识分享快乐

盛年不重来，一日难再晨。及时宜自勉，岁月不待人。

灭菌操作规程

一、微生物检验器皿的包扎

1、目的

杀菌前的准备工作

2、所用器具

(1)、棉花

(2)、橡胶塞

(3)、牛皮纸或报纸

(4)、棉绳

3、操作方法

(1)、试管：塞上棉塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做

乳糖胆盐培养基时，将试管头塞上专用塑料塞放入铁丝框。

(2)、吸移液管：将吸移液管一头塞上棉塞，然后单支或几只用纸包

起来，或用盒装。

(3)、三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口用棉塞塞好，或塞上

橡胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。

(4)、玻璃洗瓶：将玻璃洗瓶瓶口用棉塞或橡胶塞塞好，用牛皮纸把

塞头部包起来。

(5)、磁性漏斗：用牛皮纸或报纸将磁性漏斗整个包扎起来。

(6)、平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹或盒装。

二、高压蒸汽灭菌

卑微如蝼蚁、坚强似大象

共享知识分享快乐

1、适用范围

本法适用耐湿热器具的灭菌如：

(1)、易分解的、耐热性的培养基

(2)、耐热性好的玻璃器皿

(3)、橡胶

(4)、耐热性塑料

2、原理

利用1.5kgf/cm2，121℃的饱和蒸汽，灭菌20分钟。

4、仪器和设备

高压灭菌锅

5、操作方法

(1)、包装

a.装入培养基的（箱）瓶用螺旋盖盖上，容器用棉塞塞住，再用牛皮

纸包扎。螺旋盖应微松。

b.在瓶中的培养液不要超过1L，否则灭菌不彻底。

c.容器的上部应留有足够的空间，以便产生气泡。

d.器具用牛皮纸包裹，放入灭菌袋中。

e.器具的组合和包裹应允许灭菌蒸汽接触所用物品。

f.各类器具装入釜内时，相互间要留有空隙以使蒸汽自由流动。

(2)、高压杀菌

a.在灭菌器内加入适量的水（不得低于釜底指示横片，露出加热盘

管），放入需灭菌物品，盖上内盖，拧紧外盖上的螺栓。拧紧时要注

卑微如蝼蚁、坚强似大象

共享知识分享快乐

意对称的进行，否则容易造成漏气。

b.开始加热前，将排气阀打开。

c.待温度上升至100oC时（即当所有的冷空气已排出时），关闭放汽

阀门，使压力上升至1.05kgf/cm2（15磅/英吋2），在此压力下维持

20分钟。

注意：加热时间不要过长，但也不要低于指定的20分钟。

(3)、断开电源。

(4)、排气阀关闭的状态下，让釜内压力自然下降。

(5)、打开高压杀菌锅。注意必须使灭菌釜内无压力为宜。

(6)、灭菌后的物品冷却至室温，取出。

(7)、打开出水阀门，放尽釜内剩水。

6、注意事项

高压灭菌器上的安全阀，是保障安全使用的重要机构，不得随意调节。

三、干热灭菌

1、目的

保持在干燥状态下的玻璃器皿和金属的灭菌。

2、适用范围

本法适用以下的物品：

(1)、干燥的玻璃器皿（吸管、平皿等）

(2)、金属器具（镊子等）

(3)、粉状物品

(4)、瓷器

卑微如蝼蚁、坚强似大象

共享知识分享快乐

3、原理

在160oC干热空气中灭菌2小时。

4、仪器和设备

电热干燥箱

5、操作方法

(1)、器具用牛皮纸或灭菌袋包（装）扎，放入金属容器内。

(2)、器具在干燥箱加热前放入，每个器具之间留有足够的空隙，使

热空气能畅通。

(3)、关闭箱门接通电源，打开通气孔，使箱内湿空气能逸出，至箱

内温度达到100℃时关闭。

(4)、加热至160℃，保持2小时。

(5)、切断电源，冷却至60℃时，打开箱门，取出灭菌器具，并打

开箱顶通气口。

6、注意事项

(1)、灭菌时必须注意温度不能超过180℃，以免使棉花、报纸烘焦。

(2)、灭菌时不得打开箱门。

(3)、干燥箱未冷却时，不要取出里面器具，防止内外温差过大造成

玻璃器具爆炸。

四、紫外线灭菌