中性粒细胞胞外诱捕网在类风湿关节炎免疫炎症中的研究进展.docx

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中性粒细胞胞外诱捕网在类风湿关节炎免疫炎症中的研究进展

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常永龙郭锦晨

【关键词】类风湿关节炎;中性粒细胞胞外诱捕网;免疫炎症;研究进展;综述

类风湿关节炎（rheumatoidarthritis，RA）是一种自身免疫性疾病，临床以进行性、对称性、多关节非化脓性炎症为主要表现[1]。其主要以滑膜组织为靶点，以对称性、炎症性、多关节非化脓性炎症为特征。本病通常被认为是一种关节疾病，但认识到系统性炎症会导致过早的心血管死亡并对其进行预防至关重要。如不及时治疗，关节炎症可导致糜烂、关节破坏、永久性畸形乃至死亡[2]。RA的病理基础为关节滑膜增生，渗出大量炎性液体，滑膜炎持续发展导致肉芽组织覆盖关节软骨，最终软骨产生溃疡。骨面肉芽组织纤维化、骨节破坏、皮下结节是其特征性病变[3]。

目前，RA的具体病因还不明确，通常认为与遗传、感染、内分泌、免疫系统紊乱等因素有关，我国患病率为0.32%～0.36%[4]。在众多致病因素中，抗瓜氨酸蛋白抗体（ACPAs）的形成被认为是RA致病的关键环节。研究表明，RA患者在临床症状出现前3～5年就可以检测出ACPAs[5]。近期研究证明，中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）作为一种新的抗炎机制与ACPAs有着密切的关系[6]。NETs是一把双刃剑，在包括RA在内的自身免疫系统性疾病中都承担着重要的角色。因此，弄清NETs的形成机制、在RA中的调控作用以及通过以NETs的形成通路、组成成分为靶点治疗RA的可能性探索是亟需做的工作。笔者通过对近年来NETs形成机制、在RA中的调控作用以及以NETs为靶点治疗RA的可能性进行归纳总结，以期为RA的临床治疗提供新的解决方案。

1NETs的形成

中性粒细胞是机体抵御病原体入侵的第一道防线，其寿命很短，循环中细胞半衰期仅为6～8h，并受到程序性细胞死亡和随后胞吐的限制。当中性粒细胞被激活或受到损伤时，可以推迟其死亡，以支持中性粒细胞效应器的功能，如吞噬作用、细胞因子的释放和通过脱颗粒杀灭病原体。然而，中性粒细胞也可能改变细胞死亡的类型，从而影响炎性反应和组织重塑[7]，在固有免疫中发挥重要作用。近年来，人们发现一新机制：中性粒细胞受到刺激后失去内膜，并随之产生一种染色质纤维网状结构。这个结构被称为NETs，产生的过程被称为中性粒细胞胞外诱捕网凋零（NETsosis）[8]。目前，根据是否依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）可将NETs的形成分为两种途径。

1.1依赖NADPH的NETsosisNETsosis为一个逐层递进的过程，此过程主要包括活性氧（ROS）的产生、部分抗菌蛋白[如髓过氧化物酶（MPO）、弹性蛋白酶（NE）]的转运、染色质解凝、细胞膜破裂，最后释放产生NETs。诸多促炎物质具有促使NADPH氧化酶组装活化的作用[9]，从而诱导NETs的产生。在病原微生物、抗体、胆固醇、线粒体DNA（mtDNA）等刺激作用下，激活蛋白激酶C（PKC）或丝裂原本活化的蛋白激酶（MAPK），促使NADPH氧化酶活化，从而导致ROS的产生;ROS除了能杀死微生物外，还可与中性粒细胞颗粒产生NE与MPO等蛋白相关，H2O2可促进中性粒细胞颗粒的解体，解体后的NE和MPO等酶被释放到细胞质中，随后进入细胞核[10]，在NETs的产生过程中发挥重要作用。在细胞核中，NE可和丝氨酸蛋白酶剪切组蛋白，加速染色质的解凝[11]。继发核膜破裂，而核膜的破坏正是NETs形成的显著特征之一。研究表明，激活细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）在NETs形成信号转导中起着重要的作用，其可以将中性粒细胞从G0期拉回细胞周期，同时CDK4与CDK6的沉默可阻断NETs的释放，并且不影响ROS的生成、吞噬和脱颗粒，这说明在NETsosis过程中，细胞周期机制可能是促使核膜分解的重要因素，核膜破裂后，胞质颗粒释放的蛋白与解凝的染色质相混合，形成NETs[12]。NETs最终会被血浆中DNA酶水解，因为NADPH氧化酶组装活化促使产生ROS是该过程的关键，因此，被称为依赖NADPH的NETsosis。

1.2不依赖NADPH的NETsosis此过程不同于依赖NADPH的NETsosis，其需要细胞外钙离子内流，并受到线粒体ROS和小电导钾通道3（SK3）的调节[13]。细胞内胞质钙离子浓度的增加导致肽基精氨酸脱氨酶4（PAD4）的活化[14]，活化后的PAD4使組蛋白瓜氨酸化，酸化的残基被转化为瓜氨酸，正电荷减弱导致与DNA的静电结合力也减弱，从而引起染色质解凝。解凝后的染色质进入到细胞质内，并结合NE、MPO等颗粒酶和其他蛋白，最终释放至胞外，导致NETs形成[15]。钙离子的载体离子霉素、pH升高、A23187等均能诱导不依赖NADPH的NETsosis。此外，