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奥林巴斯显微镜物镜的数值孔径和分辨率

显微镜物镜的数值孔径是其聚集的光,并在一个固定的物体距离解决细标本细节

能力的量度。图像形成光波穿过试样和如图1所示的该锥形光的纵切片示出孔径

角,是由物镜的焦距确定的值中的倒置锥体进入物镜。

角μ是二分之一的孔径角(A)和涉及通过以下公式的数值孔径:

数值孔径(NA)=n(sinμ)

其中n是物镜的前透镜和样品盖玻璃,即从1.00范围为空气至1.51专门浸没油

一个值之间的成像介质的折射率。许多作者用变量α为μ数值孔径公式所示。从

这个方程很明显,当成像介质为空气(具有折射率,n=1.0),则数值孔径仅取

决于角度μ的最大值为90°。角μ的sin,因此,具有(使用干“”显微镜物镜)的

1.0(sin(90°)=1),这是用空气作为成像介质操作透镜的理论最大数值孔径的

最大值。

在实践中,但是,它是很难达到0.95以上的数值孔径值与干物镜。图2示出了

一系列从变焦距和数值孔径的物镜导出的光锥。作为锥改变光的角度为7°μ增加,

如图2(a)至图2的(c)60°,在数值孔径从0.12至0.87所得的增加,接近限

制时空气是成像中。

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通过检查数值孔径方程,很明显,折射率是在实现数值孔径大于1.0的限制因

素。因此,为了获得更高的工作数值孔径,物镜的前透镜和试样之间的介质的折

射率必须增加。显微镜物镜现在可以允许成像另类媒介,例如水(折射率=1.33),

甘油(折射率=1.47),和浸油(折射率=1.51)。护理应符合这些物镜被用于

防止当一个物镜是用比它的物镜是为不同的液浸介质中使用,这将产生不希望的

伪影。我们建议显微镜从不使用专为浸油或者用甘油或水的物镜,虽然有几个新

的物镜,最近出台了将与多个媒体合作。你应该向制造商咨询是否有任何怀疑。

在60X和100X(或更高倍率)的放大倍率范围最物镜是设计用于浸油的使用。通

过检查上面的数值孔径方程,我们发现,与浸油得到的最高理论数值孔径为1.51

(当sin(μ)=1)。在实践中,然而,大多数油浸物镜为1.4的最大数值孔径,

以最常用的数值孔径为1.0到1.35。

物镜的数值孔径也依赖,在一定程度上,在校正光学象差的量。高度校正的物镜

趋于如下表1所示,以具有更大的数值孔径为各个放大倍数。如果我们采取了一

系列典型的10倍物镜为例,我们看到,平场校正的平场物镜,数值孔径增加对应

校正色差和球面像差:平场消色差,NA=0.25;平场萤石,NA=0.30;并平场复

消色差透镜,NA=0.45。

物镜的数值孔径

放大倍率消色差萤石复消色差

(NA)(NA)(NA)

0.5X0.025N/AN/A

1X0.04N/AN/A

2X0.06N/A0.10

4X0.100.130.20

10X0.250.300.45

20X0.400.500.75

40X0.650.750.95

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