痛记忆模型大鼠ACC脑区蛋白质组学研究及电针干预.docx

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痛记忆模型大鼠ACC脑区蛋白质组学研究及电针干预

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徐立雷孙晶李菲何俏颖何晓芬沈醉刘伯宇方剑乔邵晓梅

Summary目的：采用蛋白质组学方法筛选痛记忆模型大鼠ACC脑区差异蛋白，并进一步筛选与电针干预痛记忆可能相关的差异蛋白，为电针干预痛记忆的深入研究提供理论支持。方法：将18只健康雄性SD大鼠随机分为空白组（生理盐水对照组）、模型组和电针组，每组6只。模型组及电针组大鼠通过二次角叉菜胶足跖注射建立痛记忆模型。对照组注射同等剂量的生理盐水。电针组于首次注射后5h、1～5d进行电针治疗。模型组与空白组仅作与电针组相同的束缚处理。分别检测3组大鼠造模前，首次注射后4h、5d和二次注射后4h、72h的机械痛阈。二次注射后第3天，大鼠处死后取ACC脑组织。以双向凝胶电泳分离，双向电泳后经不同波长光激发扫描得到不同样品的蛋白质组图谱，经ImageMaster2D6.0软件进行分析后，筛选相差在1.5倍以上的蛋白作为差异表达的蛋白质，并进行质谱鉴定。结果：1）与空白组比较，模型组二次未注射角叉菜胶足跖痛阈显著下降（P0.05）;与模型组比较，电针组二次未注射角叉菜胶足跖痛阈显著上升（P0.05）。2）经蛋白质组学分析共筛选出18个差异蛋白质。其中模型组有明显差异者有11个，4个表达呈现下调，分别为微管蛋白α-1A链、DAB2相互作用蛋白、NADH脱氢酶的辅酶黄素蛋白2、转凝蛋白-3;7个表达呈现上调，分别为微管蛋白β-3链、肌动蛋白1、磷酸甘油酸激酶1、类固醇激素合成急性蛋白、肌动蛋白2、细胞色素c氧化酶6A1亚基、泛素40S核糖体蛋白S27a。与空白组比较，电针组有明显差异者有15个，3个表达呈现下调，分别为微管蛋白α-1C链、RhoGDP解离抑制因子、NADH脱氢酶的辅酶黄素蛋白2;12个表达呈现上调，分别为微管蛋白β-2A链、微管蛋白β-3链、肌动蛋白1、乌头酸水合酶、丙酮酸激酶同工酶、异柠檬酸脱氢酶、磷酸甘油酸激酶1、Ras相关Rab-19蛋白、类固醇激素合成急性蛋白、肌动蛋白2、细胞色素c氧化酶6A1亚基、泛素40S核糖體蛋白S27a。电针组与模型组比较后呈现明显差异的有8个差异蛋白，2个呈现下调，分别是RhoGDP解离抑制因子、肌动蛋白2。6个呈现上调，分别是微管蛋白α-1A链、微管蛋白β-2A链、DAB2相互作用蛋白、乌头酸水合酶、异柠檬酸脱氢酶、Ras相关Rab-19蛋白。结论：经蛋白质组学分析发现，有11个差异蛋白参与痛记忆的唤醒过程;有8个差异蛋白参与电针干预痛记忆的过程。提示电针对痛记忆的干预可能与稳定神经细胞骨架蛋白，进而抑制神经突触可塑性改变有关。

Key电针;痛记忆;前扣带皮层;蛋白质组学;差异蛋白;角叉菜胶;全景式;大鼠

AbstractObjective：ToscreenthedifferentialproteinofACCbrainregioninpainmemorymodelratsbyproteomicsmethod，tofurtherscreenthedifferentialproteinsrelatedtoelectroacupunctureinterventionpainmemory，soastoprovidetheoreticalsupportforthefurtherstudyofelectroacupunctureinterventionpainmemory.Methods：Atotalof18healthymaleSpragueDawleyratsweredividedintothreegroups，with6ratsineachgroup，includingacontrolgroup，amodelgroupandanEAgroup.Thepainmemorymodelwasmadebytwicecross-injectioncarrageenaninEAandmodelgroups.ThecontrolgroupwasgiventhesamedoseofnormalsalineinthesametimepointasthemodelandEAgroup.EAwasappliedtobilateralZusanli（ST36）andgivenat5h，1～5daysafterthefirstinjectionfor30minpertime.Themodelgroupwastak