绒叶泡桐提取液对6种细菌抑菌活性的研究.docx

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绒叶泡桐提取液对6种细菌抑菌活性的研究

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臧爱梅

摘要本研究采用抑菌圈法用絨叶泡桐叶和花的石油醚、乙醇、丙酮提取液对6种细菌进行了抑菌活性测定。结果表明，泡桐叶和花的乙醇提取液及丙酮提取液对白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、水稻白叶枯病菌和金葡萄球菌4种细菌有较好的抑菌效果。其中，泡桐叶的最佳提取溶剂为丙酮，泡桐花的最佳提取溶剂为乙醇。泡桐花和叶的提取液对大肠杆菌和沙门氏杆菌均无抑菌作用；泡桐叶和花的石油醚提取液对6种细菌均无抑菌作用。

关键词绒叶泡桐；提取物；细菌；抑菌活性

S792.43A1007-5739（2017）21-0112-01

近年来，从植物中探求新的活性先导化合物或新的作用靶标，通过类推合成或生物合理设计新农药的开发已成为当前农药化学和农药毒理学研究的热点[1]。1982年，Cercos[2]用醚、乙醇、丙酮3种有机溶剂从毛泡桐果实的外种皮中提取出一种有抗菌活性的物质。这种物质对葡萄球菌和杆状病毒都有较好的抑制活性，而对酵母菌的抑制活性较小。1994年，Kang等[3]发现毛泡桐茎的丁醇提取物对葡萄球菌、链球菌等细菌有抗菌活性。1999年，Kang[4]等用甲醇对毛泡桐的茎皮进行提取，得到一种对脊髓灰质炎病毒有抗性的物质。由此可见，泡桐在天然产物研发中有着很大的研究价值和应用价值。为了进一步开发泡桐，从中寻找具有生物活性的先导化合物，采用不同溶剂对泡桐不同部位进行提取，用粗提液测定其对植物病原菌和动物病原菌的抑菌作用，为新药剂的开发奠定基础。

1材料与方法

1.1试验材料

将泡桐叶、花置于通风处自然阴干，用粉碎机粉碎成粉末，过20目标准筛，于冰箱中低温保存，备用。试验试剂有95%乙醇（分析纯）、丙酮（分析纯）、石油醚（沸程60～90℃）。供试细菌包括大肠杆菌（Escherchia.coli）、金葡萄球菌（Sta-phylococcusaureus）、沙门氏杆菌（Samonellatyphimurium）、白菜软腐病菌（Erwinia.carotovorapv.carotovora）、水稻白叶枯病菌（Xanthomonas.oryzae.pv.oryzae）、猕猴桃溃疡病菌（Pseud-omonassyringaepv.），以上菌种均由青岛农业大学植物保护学院提供。

1.2抑菌活性测定方法

采用抑菌圈法[5]用泡桐花和叶的乙醇、丙酮、石油醚提取液对6种细菌进行抑菌活性测定。首先在NA平板表面均匀涂抹供试菌悬浊液200μL，置于室温干燥5min，在每个平板表面周边距中心25mm等距离贴3片带毒滤纸片，1片对照滤纸片。然后将贴好纸片的平板置于31℃隔水培养箱中培养，18～24h观察结果。用十字交叉法测量抑菌圈的直径（包括贴片），并记录测量数据。

判定标准：以抑菌圈直径7mm者判为有抑菌作用，抑菌圈≤7mm者判为无抑菌作用，3次重复试验均达到有抑菌作用结果者，判为合格。抑菌圈直径与抑菌效果成正比，抑菌圈越大效果越好。对照应无抑菌圈产生，否则试验无效。

2结果与分析

2.1不同部位不同溶剂泡桐粗提物的抑菌试验结果

用泡桐花和叶的3种溶剂提取液对6种细菌进行抑菌活性测定（表1）。结果表明，在各溶剂干物质浓度为2g/mL时，泡桐叶的丙酮提取液和乙醇提取液对白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、水稻白叶枯病菌和金葡萄球菌4种细菌的抑菌圈直径分别为17.83、17.50、17.32、13.75mm和15.83、13.67、13.50、12.25mm；泡桐叶的石油醚提取液对6种细菌均无抑菌作用。泡桐叶的丙酮提取液抑菌作用优于乙醇提取液，即泡桐叶的最佳提取溶剂为丙酮。

泡桐花的丙酮和乙醇提取液对白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、水稻白叶枯病菌和金葡萄球菌4种细菌的抑菌圈直径分别为14.00、10.50、11.00、8.83mm和15.17、13.50、13.00、12.50mm；泡桐花的石油醚提取液对6种细菌均无抑菌作用。泡桐花的乙醇提取液抑菌效果优于丙酮提取液，所以，泡桐花的最佳提取溶剂为乙醇。泡桐叶、花的3种溶剂提取液对大肠杆菌和沙门氏杆菌均无抑菌作用。

2.2不同溶剂不同浓度泡桐粗提物的抑菌试验结果

用丙酮提取液和乙醇提取液对4种有活性的细菌进行不同浓度的抑菌活性试验（表2）。结果表明，泡桐叶的丙酮提取液稀释不同倍数后，随着稀释倍数增大，其对4种病菌的抑菌圈愈来愈小。10倍稀释液对4种菌均无抑制作用。

不同溶剂不同浓度泡桐粗提物的抑菌试验结果表明，泡桐叶、花的提取液对白菜软腐病菌的抑菌效果最好。粗提物的抑菌效果与其浓度成正相关，同一部位同一溶剂的提取物浓度越大，对同一种菌的抑菌效果越明显；浓度越小，抑菌效果越差。

3结论与讨论

用泡桐叶和花的乙醇、丙酮和