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中药有效成份的含量测定研究进展
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R284B1672-5085(2013)09-0380-02
【摘要】随着相关科学技术的发展,测定中药有效成分含量的方法得到了改进,本文综述了常用的中药有效成分含量测定方法。色谱技术将以其高效优势和多种检测方法在中药有效成分含量测定的研究中发挥重要作用。
中药以其独特的理论体系为我国民众的健康、为民族医药的发展做出了不可磨灭的贡献。近年来中药在剂型、品种、产量及应用范围等方面发展迅速,但中药多为复方制剂,其组成种类繁多,成分复杂,产地分散,生长环境、采收期、加工炮制条件不同及制剂生产工艺的因素,造成其内在质量即所含有效成分的差异。测定中药有效成分的含量是质量控制的关键。现将有关中药有效成分含量的测定方法概述如下:
1.化学定量法
化学定量法是一种古老的方法,适用于单味中药制剂或处方中无机成分的含量测定。主要包括重量法和滴定法。此类方法在复杂的处方中仅能测定出某类成分的总量,专属性不强。
2.比色法
中药的有效成分与特定显色试剂呈色后,比色测定。本法可直接测定未经分离的中药中黄酮类、蒽醌类、皂甙类、生物碱、酚性化合物等成分。
3.紫外分光光度法
中药的有效成分在紫外区有特征性吸收者,不需加显色剂就能在特定的波长有最大吸收,通过测定其吸收度计算含量。该法灵敏度可达10-4~10-7g/ml,精密度为0.5%,适用于微量和痕量组分分析,较比色法应用更广泛。该法可测定中药中黄酮类、香豆素类、皂甙类、二苯乙烯苷类等化合物的含量。
4.红外光谱法(FTIR)
红外光谱专属性强,重现性好,操作方便,能够提供极其丰富的分子结构信息。随着傅里叶变换红外光谱仪的普及,红外光谱法在中药有效成分的含量测定中也具独特的作用。有报道采用红外光谱测定中药酸枣仁和补骨脂中磷脂的含量,并与比色法测定结果比较,认为该法操作简便,结果稳定[1]。
5.薄层扫描法(TLCS)
薄层扫描法指用一定波长的光照射在薄层板上,对薄层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点或对经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描,将扫描得到的图谱及积分数据用于药品分析的鉴别,杂质检查和含量测定。基于被测成分的光谱特征分为紫外吸收光谱法、荧光法测定、分光光度法。因其分离结果直观,方法简便,灵敏度高,稳定性好,在中药复方制剂有效成分含量测定中占相当的比例。该法可用于测定绿原酸、淫羊藿苷、猪去氧胆酸、靛玉红等的含量。
6.气相色谱法(GC)
气相色谱法具有高效能,高选择性,高灵敏度,速度快,用样量少,重现性好的特点。但受样品蒸汽压的限制,只能测定挥发性成分的含量。GC以其高效的分离能力常用于中药挥发性成分(如芳香醇、蒎烯等)的测定,中药的其他成分(如酚类、生物碱、内酯类等)经衍生化反应后也可用GC分析。《中国药典》2005年版一部中有47项采用气相色谱法测定中药成分的含量。中药制剂中丹皮酚、麻黄碱、麝香酮、察香酮、冰片、斑鳌素等成分均可用此法进行含量测定[2]。
7.高效液相色谱法(HPLC)
高效液相色谱法主要是利用要测定的指标成分与其他组分在流动相与固定相中的分配系数不同而把指标成分分离出来并进行含量测定。具有分离效率高,准确性和重现性好,分析速度快,选择性优和灵敏度高的特点。其与气象色谱法比不受样品挥发性的限制,对于氨基酸、蛋白质、生物碱、核酸、类脂等挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物尤为适合。因此在中药含量测定中,高效液相色谱法使用得最为广泛,但该法对设备要求高,建立色谱条件也较薄层扫描法麻烦一些。该法检测的中药有效成分主要有生物碱类、甙类、黄酮类、蒽醌类、香豆素类、萜类、有机酸类、甾酮及甾醇类等。《中国药典》2005年版一部采用高效液相色谱法对中药成分进行含量测定多达518项。中药新药申报中,含量测定绝大部分也都采用高效液相色谱法。高效液相色谱法可同时测定中药中多种成分。
目前,对于中药有效成分含量的测定,发挥作用的主要有分光光度法、TLCS法、GC法、HPLC法等,早期的一些分析方法和技术已较少应用(如比色法、重量法、滴定法等)。关于中药有效成分含量测定的研究正在朝着全面、综合的方向发展,色谱技术以其高效优势和多种检测方法在中药有效成分含量测定的研究中发挥着越来越重要的作用。色谱技术的进一步发展必将更加提高中药有效成分含量测定的研究水平,从而建立科学完善的现代中药中药有效成分含量测定体系,为中药现代化事业的发展、使中药走向国际市场奠定坚实的技术方法基础。
参考文献
[1]王永山,许益民,邱绍娟.酸枣仁和补骨脂中磷脂成分的红外光谱测定[J].中成药,1992,14(11):34.
[2]房杏春,殷霞,相秉仁,等.高分辨气相色谱法侧定六味地黄汤中丹皮酚的含量[J].中草药,1990,21(11):10.
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