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促进消化咀嚼片的促进消化功能检验

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【摘要】目的：对酵力乐牌促进消化咀嚼片进行促进消化功能试验，以测定其是否具有促进消化的能力。方法：参照《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中的试验方法。结果：动物体重、体重增重、摄食量、食物利用率，小肠运动实验和消化酶测定三方面中任二方面实验结果阳性，可判定该受试样品动物实验结果阳性。结论：本试验条件下，受试样品剂量组的精子畸形率与阴性对照组（Veh）比较无显著性差异（P0.05），无剂量反应关系，表明三株牌歧特生冲剂对小鼠精子的精子畸形率未产生明显影响。

【关键词】酵力乐牌促进消化咀嚼片、促进消化功能

1实验动物及饲养环境

小鼠，雌性，品系：KM，来源：济南朋悦实验动物繁育有限公司，经检疫观察4d后使用。大鼠，体重120~140g，40只，雄性，品系：Wistar，来源：济南朋悦实验动物繁育有限公司，经检疫观察5d后使用。

饲养环境：屏障系统，小鼠5只/笼（同性别、同剂量组），喂食SPF鼠料，自由饮水。

2仪器及试剂

PL2001-L型电子天平，PL-303型电子精密天平，MS204TS/02型电子天平，电子数显卡尺等，复方地芬诺酯片、羧甲基纤维素钠、活性碳粉、阿拉伯树胶等

3动物分组及剂量设计

3.1体重、体重增重、摄食量和食物利用率

40只大鼠根据体重随机分为五组：阴性对照组（Veh）和低（L）、中（M）、高（H）剂量组，每组大鼠10只。本品人体推荐剂量为0.1g/kgBW。设低（L）、中（M）、高（H）剂量分别为0.5、1、3g/kgBW（分别相当于人体推荐量的5、10、30倍）。

称取样品加0.5%羧甲基纤维素钠制成0.30g/ml的高剂量样品溶液，中、低剂量样品溶液由高剂量样品溶液稀释而成。受试液配制好后按10ml/kgBW体积灌胃大鼠，空白对照组给予溶媒（0.5%羧甲基纤维素钠），每天一次，连续给予30d。

3.2小肠运动实验：50只小鼠根据体重随机分为五组：空白对照组（Veh）、模型对照组（Mo）和低（L）、中（M）、高（H）剂量组，每组小鼠10只。本品人体推荐剂量为0.1g/kgBW。设低（L）、中（M）、高（H）剂量分别为1、2、3g/kgBW（分别相当于人体推荐量的10、20、30倍）。

称取样品加0.5%羧甲基纤维素钠制成0.15g/ml的高剂量样品溶液，中、低剂量样品溶液由高剂量样品溶液稀释而成。受试液配制好后按20ml/kgBW体积灌胃小鼠，空白对照组和模型对照组给予0.5%羧甲基纤维素钠，每天一次，连续给予15d。

3.3消化酶测定：同体重、体重增重、摄食量和食物利用率测定实验共用同一组实验动物。

4试验方法

4.1体重、体重增重、摄食量和食物利用率

各剂量组大鼠经口给予受试样品，每周测2次体重和食物摄入量，实验结束时计算体重、体重增重、摄食量和食物利用率。

4.2小肠运动实验

各剂量组小鼠经口给予受试样品，模型对照组用复方地芬诺酯造模。灌胃30d后，禁食16h（期间不禁水），模型对照组和三个剂量组再给予一次受试样品或蒸馏水，30min后，各实验组和模型对照组灌胃给予复方地芬诺酯（5mg/kgBW），灌胃体积20ml/kg，空白对照组灌胃同体积蒸馏水。25min后脱颈椎处死动物，打开腹腔，剪取上自幽门、下至回盲部的肠管，在洒有生理盐水的玻璃板上，轻轻将小肠拉成直线，经自然回缩后，用1m钢直尺测量从幽门至结肠起始处的距离“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”，计算墨汁推进率。

墨汁推进率（%）=墨汁推进长度（cm）/小肠总长度（cm）×100%

4.3消化酶的测定

蛋白管的制备：取新鲜鸡蛋清充分搅拌后用医用纱布过滤，内径1mm毛细玻璃管斜放入蛋清中，经虹吸作用将蛋清吸入管内，平放在沸水上熏蒸2~5min，使管中的蛋清凝固，整个毛细玻璃管呈白色，用小砂轮截成2cm的长度备用。

各剂量组大鼠经口给予受试样品，灌胃30d后，禁食不禁水24h，采用乙醚麻醉大鼠幽门结扎法收集3.5h内排出的胃液，测定单位时间内胃液量。取胃液1ml放入50ml的三角烧瓶中，加入0.05mol/L盐酸溶液15ml摇匀，放入新鲜制作的蛋白管两根。塞好瓶口，在37℃恒温箱中孵育24h，取出蛋白管，用尺测量蛋白管两端透明部分的长度（cm），以四端之值求其平均值。计算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。

胃蛋白酶活性单位（μ/ml）=四段蛋白管透明部分长度均值2×16

胃蛋白酶排出量（μ/h）=胃蛋白酶活性×每小时胃液量

5试验数据处理

食物利用率和墨汁推进率需进行数据转换，X=Sin-1P为食物利用率和墨汁推进率，用小数表示。试验数据以组为单位分别列表计算平均值和标准差（`x±s），计量资料可用方差分析，用SPSS18.0软件进行统计学分析。

6结果

6.1体重