固相萃取学习课件.pptVIP

§5.6固相萃取（solidphaseextraction,SPE）固相萃取的目的：①从试样中除去对以后分析有干扰的物质②富集痕量组分，提高分析灵敏度③变换试样溶剂，使之与分析方法相匹配④原位衍生⑤试样脱盐⑥便于试样的存储和运送

§5.6固相萃取§5.6.1固相萃取的基本原理§5.6.2固相萃取的装置§5.6.3固相萃取法的建立§5.6.4固相萃取的应用

§5.6.1固相萃取的基本原理固相萃取的基本原理与液相色谱分离过程相仿，是一种吸附剂萃取，主要适用于液体样品的处理。当试样通过装有合适的固定相时，被测组分由于与固定相相互作用较强被吸附留在柱上，并因吸附作用力的不同而彼此分离，样品基质及其它成分与固定相作用较弱而随水流出萃取柱。被萃取的组分，用少量选择性溶剂洗脱。因此，固相萃取不仅用于“清洗”样品，除去干扰成分，而且可以使组分分级，达到浓缩或纯化的作用。

§5.6.2固相萃取的装置固相萃取的装置有柱型和盘型两种。柱型：容积为1～6mL的柱体（通常是医用级聚丙烯管），在两片聚乙烯筛板之间填充0.1～2g吸附剂。吸附剂的类型：C18、C8、氰基、苯基、双醇基填料、活性炭、硅胶、氧化铝、硅酸镁、高分子聚合物、离子交换树脂、排阻色谱吸附剂、亲和色谱吸附剂等。C18是常用的吸附剂（疏水性强，在水相中大多数有机物显保留），也可以使用其他不同选择性和保留性质的吸附剂。

§5.6.2固相萃取的装置柱体材料一般选用聚丙烯。也可以选用玻璃、纯聚四氟乙烯（PTFE）作为柱体材料。筛板材料有聚丙烯、纯聚四氟乙烯、不锈钢和钛。金属筛板不含有机杂质，但是受酸的腐蚀。为了避免从柱体、筛板、吸附剂、洗脱溶剂可能引入杂质而影响分析结果，试验时应平行作空白试验。柱型

§5.6.2固相萃取的装置为了加速样品流过，可接真空系统。为提高效率，可将多个同样或不同样的固相萃取柱置于一个架子上，下接好相应的容器，在一并装入箱中，在与真空系统相接，这样可以进行多个固相萃取柱处理。固相萃取柱使用简便，应用范围广。柱型

§5.6.2固相萃取的装置固相萃取柱存在的问题：①柱径较小，使流速受限。通常1～10ml/min。大量处理时耗时较长。②采用40mm左右的固定相填料，流速大时。妨碍某些组分的有效收集。③对于较脏的样品，如各种污水、含生物样品水样及含悬浮颗粒的水样，以堵塞，增加样品处理时间。④40mm颗粒的填充柱，易造成填充不均匀，出现缝隙，降低注效。为克服这些缺点，出现了SPE盘状结构。柱型

(2)SPE盘表观上它与膜过滤器十分相似，如下图:

§5.6.3固相萃取法的建立1柱预处理2加样3除去干扰杂质4分析物的洗脱和收集

§5.6.3固相萃取法的建立1柱预处理以C18固相萃取柱为例：先使数毫升的甲醇通过萃取柱，再用水或缓冲液顶替滞留在柱中的甲醇。柱预处理的目的是①除去填料中可能存在的杂质；②是填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。填料未经处理，能引起溶剂过早穿透，影响回收率。

§5.6.3固相萃取法的建立2加样预处理后，试样溶液被加至并通过固相萃取柱。其间，分析物被保留在吸附剂上。为防止分析物流失，试样溶液强度应适当。加到萃取柱上的试样量取决于萃取柱的尺寸（填料量）和类型、在试样溶剂中试样组分的保留性质和试样分析物及基质组分浓度等因素。

§5.6.3固相萃取法的建立固相萃取柱选定后，应进行穿透实验，进行穿透实验时，分析物的浓度应为实际试样中预期的最大浓度。最后选定的试样体积要小于上述测量值，以防止在清洗杂质时分析物受损失。

§5.6.3固相萃取法的建立3除去干扰杂质用中等强度的溶剂，将干扰组分洗脱下来，同时保持分析物仍留在柱上。对于反向萃取柱，清洗溶剂应为含适当浓度有机溶剂的水或缓冲溶液。通过调节清洗溶剂的强度和体积，尽可能出去能被洗脱的杂质。

§5.6.3固相萃取法的建立最佳清洗溶剂的强度和体积的确定：加试样于固相萃取柱上，用5～10倍固相萃取柱床体积的溶剂清洗，依次收集和分析流出液，得到清洗剂对分析物洗脱廓形。以此增加清洗溶剂强度，根据不同强度下分析物的洗脱廓形，决定清洗溶剂合适的强度和体积。

§5.6.3固相萃取法的建立固相萃取的操作过程的每一步，都能影响到分析结果的重现性。提高重现性的方法：①使用内标法，加入适当的内标物作参比；②加入样品的量适当，不超过穿透量；③选择合适的洗涤剂和洗脱剂，避免待测组分流失。了解试样基质和待测组分的性质，如结构、极性、酸碱性、溶解度、大致的浓度范围等，对选择和确定与处理方法和条件都是有帮助的。

§5.6.4固相萃取的应用1水样的处