药物制剂微生物检验.ppt

三、控制菌检查－检查流程供试品增菌培养分离培养纯培养染色镜检生化反应试验报告结果第31页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－检查流程1.增菌培养目的使被检药物中的被检菌增殖，避免出现漏检。第32页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－检查流程2.分离培养目的经增殖培养后,被检菌大量繁殖，同时其他一些杂菌也出现增殖。因此分离培养能使目的菌从混合菌中分离出来。第33页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－检查流程3.纯培养目的只是大量增殖被检菌，用于后面的进一步检验。第34页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－检查流程4.染色镜检目的初步鉴定，观察细菌的形态大小。第35页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－检查流程5.生化试验目的最终的鉴定依据，结合染色镜检得出实验结果，填写检验报告。第36页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－大肠埃希菌检查★大肠埃希菌俗称大肠杆菌，属肠杆菌科埃希菌属，革兰阴性杆菌，兼性厌氧菌，能发酵多种糖产酸产气。第37页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－大肠埃希菌检查★大肠埃希菌检查意义大肠埃希菌为条件致病菌，当人体免疫力低下或是侵入肠外组织、器官，可引起肠外感染，乃至败血症。也可随人和动物的粪便排出体外，污染环境，一旦食品、药品、水等物品中检出该菌，说明已受粪便污染，可能存在其他肠道致病菌和寄生虫卵，人们饮用或服用它们则可能引起消化道传染病。第38页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－大肠埃希菌检查书写检验记录单双阳或双阴性增菌培养供试液的制备检查结果判断配培养基和稀释液靛基质试验荧光检查一阴一阳分离纯化最终结果判断★大肠埃希菌检查流程图胆盐乳糖M蓝白萤光玫瑰红色液面EMB琼脂/麦康凯琼脂平板菌落特征→革兰染色、镜检→生化试验:乳糖发酵试验、IMViC试验第39页,共62页，星期六，2024年，5月乳糖胆盐培养基伊红美蓝琼脂培养基靛基质试验气泡，培养基呈黄色紫黑色金属光泽玫瑰红色液面麦康凯琼脂培养基：大肠杆菌呈桃红色。第40页,共62页，星期六，2024年，5月大肠埃希菌产气杆菌IMViC试验大肠埃希菌+(或-）+--产气杆菌--++吲哚（靛基质）甲基红二乙酰枸橼酸盐利用第41页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－大肠埃希菌检查★大肠埃希菌检查结果报告检出大肠埃希菌MUG阳性，靛基质阳性MUG阳性，靛基质阴性，IMViC为－＋－－，G-MUG阴性，靛基质阳性，IMViC为＋＋－－，G-MUG阳性:紫外光下管内培养物呈现蓝白色荧光第42页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－大肠菌群检查★大肠菌群检查意义大肠菌群主要存在于温血动物粪便中，随粪便排出体外后可直接污染药品，若产品中检出该菌群，表明该产品受到粪便污染，可能存在肠道致病菌并引起疾病，以此作为粪便指示菌比大肠埃希菌更具广泛卫生学意义。第43页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－大肠菌群检查产酸：黄色产气：气泡产酸产气书写检验记录单不产酸不产气增菌培养供试液的制备配培养基和稀释液检查结果判断30-35℃18-24h分离培养乳糖发酵验证试验最终结果判断30-35℃24-48h特征菌落36±1℃18~24h胆盐乳糖M产酸：黄色产气：气泡紫黑色/桃红色★大肠菌群检查流程图EMB琼脂/麦康凯琼脂平板第44页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－大肠菌群检查★大肠菌群检查结果报告－大肠菌群MPN表根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。各供试品量的检出结果最可能的大肠菌群数N（个/g或ml）1.0g或1.0ml0.1g或0.1ml0.01g或0.01ml+++＞102++-10＜N＜102+--1＜N＜10---＜1第45页,共62页，星期六，2024年，5月三、控制菌检查－铜绿假单胞菌检查★铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓