160株结核分枝杆菌药敏试验分析.docx

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160株结核分枝杆菌药敏试验分析

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【摘要】目的：探讨本院分离的分枝杆菌菌型及对抗结核药物的敏感性,以指导临床治疗。方法：采用绝对浓度间接法对160株结核分枝杆菌进行4种药物的敏感性试验。结果：440例涂阳肺结核患者经培养后共获得160株结核分枝杆菌，均为人型结核菌，无牛型结核菌；共检出耐药菌株52株，初治涂阳患者菌株耐药的有40株，复治涂阳肺结核患者菌株耐药的有12株。52株耐药菌株中，耐异烟肼13株，耐利福平18株，耐链霉素15株，耐乙胺丁醇6株；同时耐2种药物的22株，耐3种药物的8株，还有3株耐4种药物（耐HRES）。结论：结核菌耐药是影响治愈率的主要因素，对临床用药具有重要的指导意义，早期、联用、适量、规律、全程用药是治疗肺结核的关键。

【关键词】结核；分枝杆菌；药敏试验

R378.91+1A1007-8231（2017）06-0086-02

近些年,结核病的发病率呈上升趋势。致人结核病的病原菌有结核分枝杆菌与牛型分枝杆菌,而其他一些非结核分枝杆菌也能引起相似的症状,而这类菌所致疾病用抗结核方案治疗将严重延误病情,要区分它们,菌种鉴定就显得很有必要。自抗结核药物使用以来,耐药性结核病的发生率就不断增加,而近来耐多药结核的产生,对有效控制结核带来新威胁,使得结核发病率呈上升趋势[1]。结核菌药敏试验结果对指导临床合理用药,使患者得到有效治疗仍有无可替代的作用。现将分枝杆菌进行菌种鉴定及药敏试验结果报告如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

收集2013年1月份至2016年3月份收治的结核病患者、疑似结核病患者及NTM病患者的痰标本(来源于不同患者，即无重复检测的标本)，通过MB/Baet240分枝杆菌培养仪和改良罗氏管对其进行分枝杆菌分离培养，共分离培养出160株。

1.2菌种鉴定

与药敏试验同时进行，将1mg/ml的菌悬液进行100倍稀释，接种0.1ml于对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸肼(TCH)鉴别培养基上。置37℃培养4周后观察结果。

1.3药物敏感性试验

采用世界卫生组织/国际防痨和肺病联合会（WHO/IUATLD）推荐的比例法。用磨菌管法磨菌，并逐步稀释，配成10～2mg/mL和10～4mg/mL的结核分枝杆菌菌悬液。用接种环分别沾取10～2mg/mL和10～4mg/mL的菌悬液0.01mL，接种至对照及含药培养基斜面。所用对照和基础培养基为无淀粉改良罗氏培养基，分别对异烟肼（INH）、利福平（RFP）、链霉素（SM）、乙胺丁醇（EMB）4种药做药物敏感性试验。4种含药培养基内药物的终浓度分别为：INH0.2μg/mL，RFP40μg/mL，SM4μg/mL，EMB2μg/mL。37℃恒温培养箱培养，至四周后观察结果并记录培养基上菌落生长情况，计算耐药百分比。耐药百分比＜1%者报告为敏感，≥1%为耐药。

1.4敏感的药敏结果判定标准[2]

敏感：低浓度药物孔菌量＜1/10参照孔，甚至1/100参照孔菌量或无沉淀。耐药分为低耐和高耐。低耐：低浓度孔生长，但高浓度孔抑制；高耐：高、低浓度孔均生长。

1.5质量控制

本实验室通过省级实验室督导和实验室质控。每批实验用H37Rv作为质控菌株，含药培养基均不生长；试验菌株在对照培养基上生长的菌落数目少于20时，重复实验。

2.结果

440例涂阳肺结核患者经培养后共获得160株结核分枝杆菌，均为人型结核菌，无牛型结核菌；共检出耐药菌株52株（52/160,32.50%），初治涂阳患者菌株耐药的有40株（40/52,76.92%），复治涂阳肺结核患者菌株耐药的有12株（12/52,23.08%）。52株耐药菌株中，耐异烟肼13株（13/52,25.00%），耐利福平18株（18/52,34.62%），耐链霉素15株（15/52,28.85%），耐乙胺丁醇6株（6/52,11.54%）；同时耐2种药物的22株（22/52,42.31%），耐3种药物的8株（8/52,15.38%），还有3株（3/52,5.77%）耐4种药物（耐HRES）。

3.讨论

耐药结核病的增多与传播已成为全球结核病发病率急骤上升的原因之一，特别是耐多药肺结核的发生对结核病的控制造成了极大的威胁[3]。耐药结核病防治是目前结核病控制面临的重大挑战之一。及时掌握结核病疫情和结核杆菌耐药情况，对开展结核病耐药菌监测具有非常重要的意义。结核杆菌耐药根据其产生的原因不同可分为原发性耐药和获得性耐药，而原发耐药是耐药结核病产生的重要原因。原发耐药需严格掌握既往用药情况，较难准确获得，目前常用初始耐药率来代替。

本研究中分离出的160株结核分枝杆菌，均为人型结核菌，无牛型结核菌；其中共检出耐药菌株52株。52株耐药菌株中，耐异烟肼13株，耐利福平18株，耐链霉素15株，耐乙胺丁醇6株；同