基于lncGAS5_DNMT3A通路探讨心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响.pdf

第４２卷第３期中华中医药学刊Ｖｏｌ．４２Ｎｏ．３

２０２４年３月ＣＨＩＮＥＳＥＡＲＣＨＩＶＥＳＯＦＴＲＡＤＩＴＩＯＮＡＬＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥＭａｒ．２０２４

ＤＯＩ：１０．１３１９３／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３７７１７．２０２４．０３．０１５

基于ｌｎｃＧＡＳ５／ＤＮＭＴ３Ａ通路探讨心康冲剂

对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

１２１１１１３

郭冰，毛以林，余意，王敏，李园，贺璇，刘蓉芳

（１．湖南中医药大学，湖南长沙４１０２０８；２．湖南中医药大学第二附属医院，湖南长沙４１０００５；

３．江门市五邑中医院，广东江门５２９０００）

摘要：目的探讨心康冲剂调控长链非编码ＲＮＡ生长停滞特异性转录本５（ｌｏｎｇｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇＲＮＡｇｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｐｅｃｉｆ

ｉｃｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ５，ｌｎｃＧＡＳ５）／ＤＮＡ甲基转移酶３Ａ（ＤＮＡｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ３Ａ，ＤＮＭＴ３Ａ）通路抗慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化

的机制。方法６２只ＳＤ大鼠，其中随机取６只大鼠为正常组，余５６只经腹腔注射阿霉素药物建立慢性心力衰竭模型，

将造模成功的５２只大鼠随机分为模型组１２只（注射ＰＢＳ＋生理盐水灌胃），ＧＡＳ５沉默组（注射ＡＡＶ９－ＧＡＳ５－ＲＮＡｉ病

毒＋生理盐水灌胃）、阴性对照组（注射ＡＡＶＮＣ病毒＋生理盐水灌胃）、心康冲剂组（注射ＡＡＶ９－ＧＡＳ５－ＲＮＡｉ病毒＋

心康冲剂溶液灌胃）、缬沙坦组（注射ＡＡＶ９－ＧＡＳ５－ＲＮＡｉ病毒＋缬沙坦溶液灌胃）各１０只。分组处理后，心脏超声检

测各组大鼠心功能；Ｍａｓｓｏｎ染色观察心脏组织形态；免疫荧光染色检测各组大鼠左心室纤维化蛋白－ＳＭＡ表达；酶联

α

免疫吸附法检测大鼠血清ＣｏｌＩ表达；实时荧光定量ＰＣＲ法检测各组大鼠心尖组织ｌｎｃＧＡＳ５、ＤＮＭＴ３ＡｍＲＮＡ；Ｗｅｓｔｅｒｎ

ｂｌｏｔ法检测ＤＮＭＴ３Ａ、第１０号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｄｅｌｅｔｅｄｏｎｃｈｒｏ

ｍｏｓｏｍｅｔｅｎ，ＰＴＥＮ）、磷酸化蛋白质激酶蛋白Ｂ（ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＢ，ＡＫＴ）各蛋白表达量。结果与正常组相

比，模型组大鼠左室射血分数（ｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｅｊｅｃｔｉｏｎｆｒａｃｔｉｏｎｓ，ＬＶＥＦ）、左心室短轴缩短率（ｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｆｒａｃｔｉｏｎａｌｓｈｏｒｔ

ｅｎｉｎｇ，ＬＶＦＳ）均明显降低（Ｐ＜００５）；染色结果显示心肌纤维化严重；血液中Ｉ型胶原（ｔｙｐｅＩｃｏｌｌａｇｅｎ，ＣｏｌＩ）明显升高

（Ｐ＜００５）；ｌｎｃＧＡＳ５ｍＲＮＡ表达降低，ＤＮＭＴ３ＡｍＲＮＡ及蛋白表达升高，ＰＴＥＮ蛋白表达降低，ＡＫＴ蛋白表达升高（Ｐ＜

００５）；与模型组相比，ＧＡＳ５沉默组染色或指标结果进一步降低或升高；与ＧＡＳ５沉默组相比，染色结果显示心康冲剂、

缬沙坦组干预后心肌纤维化减轻，ＬＶＥＦ、ＬＶＦＳ都不同程度地增加（Ｐ＜００５）；血清中ＣｏｌＩ水平降低；ｌｎｃＧＡＳ５ｍＲＮＡ表

达升高，ＤＮＭＴ３ＡｍＲＮＡ表达降低；ＤＮＭＴ３Ａ、ＡＫＴ蛋白表达降低，ＰＴＥＮ蛋白表达升高（Ｐ＜００５）。结论心康冲剂可通

过调控ｌｎｃＧＡＳ５／ＤＮＭＴ３Ａ／ＰＴＥＮ／ＡＫＴ通路及下游纤维化因子，从而改善慢性心力衰竭之心肌纤维化。

关键词：心康冲剂；慢性心力衰竭；心肌纤维化；ｌｎｃＧＡＳ