一种新型蛋白酶体抑制剂药学.pptx

Pyrrolizilactone是一种新型的蛋白酶体抑制剂——通过MorphoBase和ChemProteoBase表型分析系统进行确证药学122陈柯文学号种新型的真菌的双吡咯烷类代谢物

刊名：Chembiochem?出版日期：2013?卷号：Vol.14?期号：No.18?页码：2456-2463Scopus粗检索“targetidentification”,结果中再检索“molecular”，粗看文献摘要进行筛选。百链找到的文献在Scopus不能直接下载，在百链上用文献标题精确检索.Willy百链指向获得途径——WillyOnlineLibrary,从而下载全文。文献标题：IdentificationofaMolecularTargetofaNovelFungalMetabolite,Pyrrolizilactone,byPhenotypicProfilingSystems影响因子：2013:3.060;2012:3.740;2011:3.944;2010:3.945;2009:3.824

蛋白酶体是在真核生物和古菌中普遍存在的，在一些原核生物中也存在的一种巨型蛋白质复合物。在真核生物中，蛋白酶体位于细胞核和细胞质中?。蛋白酶体的主要作用是通过降解细胞不需要的或受到损伤的蛋白质，诱导细胞凋亡，调控细胞周期，参与适应性免疫系统的运作。蛋白酶体的结构图（从上往下看）从结构上看，蛋白酶体是一个桶状的复合物，包括一个由四个堆积在一起的环所组成的“核心”（右图中蓝色部分），核心中空，形成一个空腔。其中，每一个环由七个蛋白质分子组成。中间的两个环各由七个β亚基组成，并含有六个蛋白酶的活性位点。最普遍的蛋白酶体的形式是26S蛋白酶体，其分子量约为2000kDa，包含有一个20S核心颗粒和两个19S调节颗粒。所有的20S颗粒都由四个堆积的七元环所组成，这些环结构则是由两种不同的亚基构成：α亚基为结构性蛋白，而β亚基则发挥主要的催化作用。靶标

1TargetpredictionofpyrrolizilactonebyMorphoBaseprofiling1.测定pyrrolizilactone对几种癌细胞株生长活性的抑制作用，对照组为其他的蛋白酶体抑制剂，如乳胞素.（lactacystin）等.结果分析：用pyrrolizilactone治疗后，发现亚微摩尔的IC50值浓度对各癌细胞株有适度细胞毒性，且细胞表现出独特形态变化，与乳胞素、UCS1025A等蛋白酶体抑制剂治疗结果类似。

TargetpredictionofpyrrolizilactonebyMorphoBaseprofiling2.用pyrrolizilactone和UCS1025A分别处理srcts-NRK和HeLa细胞株，通过定量细胞分析仪，将所得到的多个表型参数与参考数据集比较，进行统计分析。pyrrolizilactone和UCS1025A的主成分分析打分投射到PC1-PC22D散点图（见下图）此外，与其它传统的蛋白酶体抑制剂的主成分分析的打分进行对比。结果分析：在PC1-PC22D散点图中pyrrolizilactone与其它传统蛋白酶体抑制剂打分接近，故可推测蛋白酶体也是pyrrolizilactone的靶标。为更充分证明这一点，进行ChemProteoBase表型分析。

TargetpredictionofpyrrolizilactonebyMorphoBaseprofiling

2CourseobjectivesCourseobjectivesCourseobjectivesTargetpredictionofpyrrolizilactonebyChemProteoBaseprofiling1.HeLa细胞用20毫摩的pyrrolizilactone进行处理18小时，结果跑荧光差异凝胶电泳。选取凝胶上的296个蛋白点，使用2D-DIGE系统软件，并联系数据库中已确证的42种小分子进行层次聚类分析，结果用热点图和树状图表示。结果分析：正如同MorphoBase表型分析所的数据，通过二维荧光差异凝胶电泳及相关数据库分析。pyrrolizilactone与MG-132、蛋白酶抑制剂II、乳胞素等有着相似的主要表观特征。另外，经pyrrolizilactone处理后的细胞的蛋白表达量明显增加，与其他经蛋白酶体抑制剂处理后的细胞的结果是一样。

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